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仿刺参溶菌酶在重组酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-24 阅读:400
采用酿酒酵母MKP-0表达仿刺参溶菌酶蛋白(AjLys).以质粒pMD18-AjLys为模板,PCR扩增将组氨酸标签His-tag克隆到AjLys基因的N末端,构建克隆载体pMD18-His6-AjLys.根据密码子偏好性,通过定点突变对AjLys蛋白第69、77和95位的3个精氨酸的密码子进行优化,得到克隆载体pMD18-His6-AjLys (Δ69,77,95).经Spe Ⅰ/Bgl Ⅱ酶切,构建重组表达质粒pESC-LEU-His6-AjLys和pESC-LEU-His6-AjLys (Δ69,77,95).基因工程菌pESC-LEU-His6-AjLys (Δ69,77,95)/MKP-0通过半乳糖诱导72 h后,Western Blot检测结果表明其成功表达了AjLys蛋白.抑菌实验结果表明,AjLys蛋白对溶壁微球菌具有一定的抑制作用.本实验成功构建了AjLys的酿酒酵母表达载体,并可在MKP-0细胞中表达了具有活性的AjLys蛋白,为AjLys的生产提供了一种具有可行性的新方法.
本发明公开了一种液态法白酒经第二次发酵老熟制备出固态法白酒的方法,旨在于提供一种可缩短酒的老熟时间,并能达到名优白酒品质的酿酒方法。其主要包括依次进行的发酵、蒸馏和老熟三个工序,其技术要点是:在酒的老熟工序中加入菌液进行发酵以缩短老熟时间。所用菌液的组分为:酵母菌20~30%;乳酸菌、己酸菌、乙酸菌、丁酸菌总含量为30~40%;放线菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌总含量为30~40%。本发明简便易行,向蒸馏所得的原浆酒中加入菌液老熟发酵90~100天即可达到有些厂家贮存一到三年的白酒的质量,与普通酿酒方法相比可节省大量的粮食,其产酒率可达到70%以上,且本发明酿造出的白酒无需添加食品添加剂、食用香精及甜味剂即可达到固态白酒一级酒的标准。
介绍了一种新型低能耗、高效膜生物反应器--内循环膜生物反应器(ICMBR).反应器是在IC反应器的第二好氧反应室设置中空纤维膜组件和穿孔曝气管构成的IC+MBR集成工艺;其运行特征相当于上流式厌氧污泥床(UASB)和膜生物反应器(MBR)的串联运行,并利用气体提升达到内循环,成功实现有机物去除和同步生物脱氮,CODCr和TN去除率分别达到90%以上.
本文通过对贺兰山东麓葡萄越冬期间和霜冻日温度等指标测定,调查分析自然越冬霜冻后3个酿酒葡萄、11个鲜食葡萄品种的植株存活率、节位芽眼萌发、节位着穗状况,认为宁夏贺兰山东麓越冬期间1~2月致死温度区累积时数合计61 h,耦合低的空气相对湿度与晚霜的频发是导致葡萄自然越冬存活率低的主要外部原因.数据显示,贺兰山东麓种植的'霞多丽''赤霞珠''马瑟兰'抗寒性差,且存活品种植株主要为主蔓根茎地表萌发再生,不适宜自然越冬栽培;鲜食葡萄品种植株存活百分率在50%以上的品种为'摩尔多瓦''玫瑰香''夏黑'.对指导葡萄材料覆盖越冬防寒栽培,自然越冬栽培品种选择有现实指导意义.
本发明属于污水处理领域,主要目的是提供一种操作简便、运行成本低且处理效果好的白酒生产废水的处理方法,步骤包括:调节废水pH至中性;混凝沉淀初步去除杂质、厌氧水解、混凝气浮处理、好氧生物处理、出水经竖流沉淀和砂滤后达标排放;本发明的技术核心在于设计了一种针对具有有机污染物浓度高、悬浮物含量高、呈酸性的白酒生产废水的处理工艺,采用混凝沉淀+厌氧水解+混凝气浮+好氧生物处理+过滤处理的组合工艺方法达到对白酒生产废水的可靠、高效地处理。同时所采用的工艺步骤和条件都是常规的处理工艺,操作简便,运行成本也较低。
以啤酒糟为原料,采用双酶水解法制备高F值寡肽。通过对蛋白质水解度的测定,采用响应面法进行优化,得出双酶水解最佳条件为:碱性蛋白酶加酶量为6%、酶解时间4h、pH8.6、酶解温度56℃;木瓜蛋白酶的加酶量为3%、酶解时间3h、pH6.3、酶解温度48℃。用活性炭吸附酶解液,去除其中的芳香族氨基酸,采用G-25葡聚糖凝胶分离纯化,测其分子质量为794.24u,此时的F值为21.02。

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