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黑曲霉糖化酶基因在酿酒酵母中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-29 阅读:378
从黑曲霉eDNA文库中筛选出糖化酶基因,并在酿酒酵母中进行表达.阳性克隆在发酵培养基中培养60h后,产生的糖化酶酶活力达到峰值为4.3U/mL.测定结果显示其糖化酶大小为1908bp,编码636个氨基酸残基组成的蛋白质.酶学性质分析显示该酶的最适反应温度为50℃,pH为5.0.经柱分离纯化其发酵上清液后,SDS-PAGE电泳方法,测得它的分子量大约为70kD,且条带清晰.
本实用新型涉及一种蒸发冷却式白酒蒸馏冷凝装置,其特征在于包括机壳,机壳下部设有水箱,蒸发冷却换热器及喷淋装置安装在水箱上方的机壳的两个侧壁之间,循环水泵通过水管连接水箱及喷淋装置,排风机装置在蒸发冷却换热器及喷淋装置下方的机壳侧壁上,进风口设置在与排风机相对的机壳侧壁上于换热器及喷淋装置的上方,排风机的内侧设有除雾器;机壳的一侧设有封头,蒸发冷却换热器的出口管延伸至封头的底部,封头的上部设有排酒管,排酒管连接酒罐。本实用新型利用蒸发冷却换热器及循环水喷淋,使酒气在蒸发冷却换热器进行强化热交换,提高换热效率及酒汽的冷凝效率,提高白酒产量,减少冷却水消耗,节省水资源。
采用两相厌氧—好氧工艺,在厌氧接触池投入塑料环,后接自行研究开发的厌氧挡板反应器(内设20 μm沸石载体),再接SBR反应池处理白酒淘洗生产废水。重点介绍了废水处理工程的设计特点和运行效果。运行结果表明了处理效果十分稳定,进水CODCr在3 000 mg/L左右,出水均在100 mg/L以下,并对调试运行中出现的问题进行了讨论。
本发明公开了一种多粮食清香型白酒,按重量份计由如下原料组成:高粱5-20、玉米5-20、大麦5-10、小麦10-20、大米1-10、苦荞40-60、糯米1-15、水60-80。本发明还提供一种多粮食清香型白酒的制备方法,包括以下步骤:1)清洗、蒸煮;2)降温;3)发酵;4)蒸馏;本发明方法操作简单,经济环保,制备的白酒兼具多种粮食的营养价值及功效,清香风味浓郁,绵甜醇厚。
以中性醋酸铅作澄清剂,对葡萄酒中单宁,蛋白质、果胶、有机酸等物质进行沉淀处理后进行残糖检测.结果表明,经处理的酒样残糖检测值接近实际含量;未经处理的红酒样残糖检测值与实际含量误差较大,约高于实际含量的2倍;干白酒样经处理残糖检测值与未经处理的检测值偏差小.由此说明,在分析富含多酚类等物质的红葡萄酒残糖时,需要对酒样进行处理去掉单宁等物质避免由其引起的检测误差.
为明晰糠硫醇生物转化机制,将来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G20的胱硫醚β-裂解酶(cystathionine β-lyase,Str3p)在大肠杆菌(Escherichia coli)中实现异源表达,并验证其催化性质.正交设计试验优化大肠杆菌基因工程菌蛋白表达的诱导条件,其最适诱导表达条件为诱导温度20℃、异丙基硫代半乳糖苷浓度0.5 mmol/L、诱导时间13h.该条件下获得的菌体经超声破碎和镍柱亲和层析,纯化得到的可溶性Str3p分子质量约为52 kDa,其表达量达1.26 mg/mL,较优化前的表达量和酶活力分别提高41.7%和38.6%.实验发现Str3p能够催化裂解半胱氨酸-糠醛加合物生成糠硫醇,且催化过程受pH值影响较大,在pH 8.0时糠硫醇产量达到47 μmol/L.本研究确定Str3p在E.coli BL21中的异源表达及催化特性,为生物转化合成天然糠硫醇提供新的参考途径.

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