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CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体的构建

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-30 阅读:105
为了赋予工业酿酒酵母对淀粉和纤维素的降解活性,提高酿酒酵母对粗木薯粉进行酒精发酵时的酒精产率;另一方面,为了解决工业酿酒酵母不适于使用营养缺陷型筛选标记对转化子进行筛选的问题,以及避免引入抗药性标记基因带来的安全性问题,构建了以抗铜蛋白基因CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体.以载体pYES2-PMF-rDNA为基础,以新的筛选标记基因CUP1替换原有的尿嘧啶Ura-基因,得到载体pYES2M.再顺序插入葡聚糖内切酶基因eg3、葡萄糖淀糖酶基因gal和β-葡萄糖苷酶基因bgl1,构建得到以CUP1为筛选标记的酵母整合型三价表达载体pYES2M-eg3-ga1 -bgl1,其中每个基因都具有独立而完整的表达盒,包括启动子、信号肽和终止子,从而实现多基因单表达载体一次转化.
高台县小杂粮主要品种有小豆、啤酒大麦、荞麦、糜子、豇豆、蚕豆、藜麦等,由于认识不到位,使实用技术得不到及时推广,因此存在种植规模小、品种更新缓慢、科技含低等问题.只有转变观念,形成共识,强化科技支撑,在提高小杂粮产量和品质上下功夫,并加大对龙头企业的培育,推进产业化经营,实施品牌战略,健全完善服务体系,才能促进小杂粮产业持续发展.
为研究燃料乙醇生产废水回用的可行性,以燃料乙醇生产发酵过程中产生的清液和二次凝水为研究对象,分析其有机酸组成,并研究单一有机酸和经D318离子交换树脂处理前后的清液和二次凝水对酿酒酵母Saccharomyce cerevisiae NJ-2019生长和发酵生产乙醇的影响.结果显示,乙酸、乳酸、丙酸和柠檬酸是清液中的主要有机酸,乙酸和乳酸是二次凝水中的主要有机酸;乳酸和丙酸对酿酒酵母S.cerevisiae NJ-2019的生长和发酵过程表现出显著抑制作用,其最低抑制浓度分别为7.0 g/L和1.0 g/L;清液和二次凝水分别直接回用时,清液对乙醇发酵过程的抑制作用更强;去除或者部分去除有机酸能使清液和二次凝水回用时的乙醇产量分别提高10.11%和9.85%.燃料乙醇发酵过程产生的清液和二次凝水具有回用的潜力,有利于实现乙醇生产过程节能减排.
Lager酵母(Saccharomyces pastorianus)是由酿酒酵母(S.cerevisiae)与真贝氏酵母(S.eubayanus)通过自然杂交获得的异源多倍体菌株.Lager酵母保留了来自于两个亲本的染色体,同时也产生了新的重组片段,这就赋予Lager酵母适合低温发酵、麦芽三糖利用率高等重要特性.根据菌株的染色体含量,可以将Lager酵母分为两个类型:Group Ⅰ型(Saaz型)与GroupⅡ型(Frohberg型).近年来,多株Lager酵母菌株陆续完成了全基因组测序,为探索不同类型Lager酵母起源提供了基因组学基础.该文综述了Lager酵母的起源及基因组信息,并讨论了不同类型Lager酵母进化的模型.
从香料作物甜罗勒上经富集培养筛选出产香菌株后,对其进行形态学观察和ITS序列分析,并对其筛选培养基产生的挥发性成分进行差异性分析和聚类分析(HCA).结果表明:共筛选到6株产香真菌,经鉴定L-1是绿色木霉,L-2是深绿木霉,YM是厚垣镰刀菌,GM是可可毛色二孢,LL是出芽短梗霉;P 3可能是是酿酒酵母.其中L-1和L-2挥发性成分较为相似,YM和P3较为相似,其余各菌株差异性较大,说明同属真菌的挥发性成分存在一定的相似性.
提前确定采收期在葡萄酒酿造中非常重要,采收期主要和气候有关,在研究收集了宁夏银川地区6年的气象和葡萄成熟度资料,并根据这些资料进行相关回归分析,建立了回归方程,对该地区酿酒葡萄采收期预测进行了探讨性研究.

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