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树干毕赤酵母木糖还原酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-22 阅读:633
根据NCBI中的木糖还原酶基因序列设计引物,利用高保真聚合酶克隆树干毕赤酵母木糖还原酶基因,加A后克隆到质粒pGM-T中,测序验证.然后将目的基因克隆到舍有强启动子的穿梭表达载体p424GPD中,构建含有XYL1基因的重组质粒p424GPD-XYL1.将p424GPD-XYL1转化到大肠杆菌中,提取总蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析.酶活测定确定木糖还原酶基因XYL1在大肠杆菌中得到活性表达,表明表达载体构建成功.表达载体的成功构建为后续构建重组酿酒酵母利用木糖发酵奠定基础.
对啤酒机输送链进行了试验研究,根据不同链条在啤酒机的耐磨抗腐蚀性试验结果,分析了不同材料和几何尺寸对链条使用寿命的影响,并且进行了实用试验,给出了提高链条耐磨抗腐蚀的基本方法。
优化了酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae GIM-2发酵工艺条件并对其发酵造纸污泥产乙醇进行了研究.以模拟造纸污泥水解液中糖成分的混合糖为试验原料,采用响应面分析法优化酵母发酵生产乙醇工艺,得优化条件:温度33.1℃,pH值5.4,摇床转速50 r/min,发酵24 h糖醇转化率为38%.造纸污泥在纤维素酶作用下水解48 h,纤维素转化率为58.2%,水解液在优化条件下发酵24 h槠醇转化率为28.4%,产率达0.14g乙醇/g污泥,是理论值的37.3%.
目的:利用甜叶菊糖基转移酶UGT76G1特异性催化甜菊糖中含量高并且具有较强后苦味的甜菊甙生成高甜度的莱鲍迪甙A。方法:将合成UGT76G1编码基因插入pYES2载体的EcoRI和XhoI酶切位点之间,成功构建了pYES2-UGT重组质粒。重组质粒导入表达宿主酿酒酵母YPH499,利用2%半乳糖对重组菌进行诱导表达。结果:确定了最佳诱导时机为菌体培养后48h,诱导表达时间为12h。并对重组酶粗酶液性质进行了初步研究,确定其最适反应pH为8.0,最适反应温度为40℃,最佳反应时间36h。结论:为建立经济高效的生物催化法对甜菊糖口味改质奠定了基础。
近年来,随着市场经济的飞速发展,商品粮价格不断攀升,市场供不应求.高粱作为旱作粮食,是山西省的主要作物之一,不仅可以作为食用杂粮、牲畜的饲料,也是酿酒主要的原料.在山西省有着广阔的市场及应用前景,高粱的种植技术和病虫害防治是决定高粱稳产、高产的重要因素.
本发明公开了一种高效的白酒蒸馏单元,包括甑桶和冷凝器,所述甑桶与冷凝器之间采用蒸汽管道相连,所述冷凝器包括位于上端的蒸汽缓冲腔和位于下端的冷凝液集液腔,所述蒸汽缓冲腔与所述冷凝液集液腔之间设有冷凝单元,所述蒸汽管道与所述蒸汽缓冲腔相连,所述冷凝液集液腔的底部设有冷凝液出液管;所述冷凝单元包括分别与所述蒸汽缓冲腔和冷凝液集液腔相通的冷凝管,所述冷凝管外套装设有冷凝介质管,所述冷凝介质管的下端设有冷凝介质进口,上端设有冷凝介质出口。通过将冷凝单元设置为两层,内层为冷凝管,外层为冷凝介质管,使用时,在冷凝介质管通入与酒蒸汽输送方向相反的冷凝介质,通过调节冷凝介质的流速,可提高酒蒸汽的冷凝效率。

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