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产Surfactin芽孢杆菌的筛选及特性研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-06 阅读:355
以发酵上清液表面活性的排油活性、乳化能力、表面张力为初筛参数,srfA基因为复筛指标,定向筛选产表面活性剂surfactin的菌株.通过薄层层析(thin layer chromatography,TLC)定性分析和超高效液相色谱-电喷雾四级杆飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography/electrospray ionization quadrupole time-of-flight high-resolution/mass spectrometry,UPLC-ESI/Q-TOF/MS)定量分析,筛选获得1株可利用啤酒糟高产surfactin的菌株41-3,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),采用液质分析所产surfactin同系物组分.B.subtilis 41-3在MSM培养基中发酵,surfactin产量为541.32 mg/L,同系物以脂肪酸链为C14和C13的surfactin为主,两者含量约占75%.以啤酒糟酶解液作为碳源,发酵生产surfactin,产量提高1.38倍,达到746.35 mg/L.且surfactin的合成向长链脂肪酸surfactin迁移,表明其具有更强的生物表面活性.该研究结果为surfactin菌株筛选提供新的思路,为发酵生产surfactin提供了新的原料来源,为啤酒糟综合利用提供新的途径,具有应用前景.
以苹果汁(pH3.64)为培养基,在苹果汁中分别加柠檬酸(CA)2.6、5 4 、9.9、19.0、32.8、47.1、61.5/L,对应苹果汁的pH分别为3.20、2.97、2.74、2.51、2.31、2.17、2.03,研究了CA时酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae sp.)生长、酒精发酵的影响.结果表明:CA浓度为2.6~61.5s/L时,酿酒酵母能发酵,发酵周期随CA浓度增大而延长.CA浓度2.6、5.4、9.9、19.0g/L时,对酿酒酵母的细胞总数、死亡率、残糖量、酒精与挥发酸含量没有显著影响(P>0.05);CA浓度为32.8、47.1g/L时,酿酒酵母细胞总数显著减少(P<0.05),死亡率极显著提高、残糖量极显著增多、挥发酸生成极显著升高(P>0.01),对酒精生成没有显著影响(P>0.05).CA浓度2.6、5.4S/L时,对酵母细胞体积无显著影响(P>0.05);当CA浓度≥9.9'g/L时,体积极显著减小(P<0.01).比较47.1和61.5g/L两个CA浓度,发酵苹果汁中酿酒酵母细胞总数、死亡率没有显著差异(P>0.05),后者细胞体积显著减小(P<0.05)且发酵不彻底.CA浓度为0、2.6、5.4、9.9、19.0、32.8g/L时,发酵后滴定酸升高;CA浓度为47.1、61.5g/L时,发酵后滴定酸降低.
[目的]利用HPLC法对梅鹿辄葡萄和葡萄酒中的花色素苷组分及其相对含量进行研究.[方法]利用乙醇提取酿酒葡萄梅鹿辄中的花色素苷,并用HPLC法分别测定梅鹿辄葡萄及葡萄酒中的花色素苷.[结果]在梅鹿辄葡萄果实及葡萄酒中测得的9种花色素苷中,均以二甲花翠素3-O-葡萄糖苷含量最高,分别占总成分的28.41%和54.00%;在果实中二甲花翠素3-O-(6-O-乙酰)葡萄糖苷、二甲花翠素3-O-(6-O-对香豆酰)葡萄糖苷分别以22.16%和25.28%的含量构成主要花色素苷,而在葡萄酒中这两种花色素苷含量迅速下降,分别降至4.32%;11.88%,不是梅鹿辄葡萄酒中的主要呈色成分.[结论]初步分析了花色素苷在梅鹿辄葡萄浆果向葡萄酒转变过程中的变化,为客观鉴定葡萄品种及其他研究提供了依据.
白酒生产工艺技术很长时期以来一直都是业界人士所研究的话题,生产工艺的好坏,就会直接性影响着白酒质量的好坏.然而现在,很多人士依旧固守着自己的传统酿造白酒技术,美其名曰为继承传统,致使我国的生产白酒技术停滞不前,针对于这种现状,本文首先详细介绍了白酒的生产工艺技术.
为探讨不同的酿造原料、发酵程度(乙醇体积分数)、酿造方式及酒龄等因素对黄酒中阳离子浓度水平的影响,特别是黄酒中的NH+含量.采用离子色谱抑制电导法检测并对比黄酒、白酒、啤酒、葡萄酒4种酒样类型(共27个样品)中阳离子含量变化.色谱分离选用Ion Pac CS16分析柱(5mm×250 mm)和Ion Pac CG16保护柱(5mm×50 mm),淋洗液为30 mmol/L甲基磺酸溶液.结果 表明:方法回归系数良好(r2≥0.999 0),相对标准偏差不大于5.52(n=6),在检测的18种黄酒中,NH4+的质量浓度范围为137.00~284.01 mg/L,在啤酒及葡萄酒中为28.29~42.88 mg/L,在白酒中未检出.进一步研究表明,黄酒中高含量NH4+与原料中粗蛋白含量有关,NH4+的含量与发酵程度有关;其次黄酒中阳离子的含量与酒龄没有明显规律.作为蒸馏酒的白酒中整体阳离子含量普遍较低,葡萄酒由于葡萄原料的K+含量较高,导致葡萄酒中K+含量远高于其他类型酒样.
以诱变获得的酿酒酵母突变株YF(ZnCl2r,Ethr)为试验菌株,通过摇瓶发酵、发酵罐补料分批发酵,对突变株发酵生产谷胱甘肽进行研究.确定发酵罐分批发酵的最佳培养条件为:温度30℃,pH 6.0,接种量为20%,搅拌转速为150 r/min,通气量为250 L/h.在补料分批操作方式下,分别考察了摇瓶培养、发酵罐培养YF(ZnCl2r,Ethr)对GSH生物合成的影响.确定摇瓶培养条件:初糖10g/L,发酵4h、10h、16h、22 h、28h时分别补糖25 g/L、15g/L、5g/L、5g/L、5g/L使总糖达到 65 g/L,测得细胞干重达12.75 g/L,GSH浓度和胞内GSH含量达到 76.49 mg/L和0.59%.发酵罐初糖浓度20 g/L,发酵12 h开始补糖24 h使最终总糖达为160 g/L,测得细胞干重为30.95 g/L,GSH浓度和胞内GSH含量达到68.49 mg/L和0.3%.

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