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嗜热链球菌促生长物质研究及增殖培养基优化筛选

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-06 阅读:854
研究了在MRS培养基中添加不同营养物质对嗜热链球菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了嗜热链球菌的增殖培养基.结果表明:在MRS培养基中添加玉米浆、番茄汁、啤酒液、乳糖可显著促进试验菌株的细胞生长(P<0.01),而添加蛋白胨、酵母浸膏、CaCl2对细胞生长无显著影响(P>0.01);利用L934正交试验筛选出增殖培养基的最佳配比为:在MRS培养基中添加0.3%玉米浆、7.5%番茄汁、5.0%啤酒液、1.0%乳糖;试验菌株在增殖培养基中经37℃培养24h,活菌数可达4.69×109cfu/ml,较对照MRS培养基的活菌数提高40.78倍.
目的:了解大型酿酒企业工人感染皮肤癣菌病的种类、发病率、传播途径及治疗手段的有效性.方法:于2005-03/06选择泸州地区数家大型酿酒企业的酿酒工人628名和企业行政职员436名为调查对象.采用自行设计的调查表记录调查对象的性别、年龄、皮肤真菌感染的皮损情况,并询问其治疗情况和身体状况.对所患手癣、足癣、体癣、股癣、花斑癣和甲癣进行真菌检测.外搽硝酸咪康唑乳膏,2~3次/d,总疗程为4周,每2周随访1次.疗效判断以痊愈为临床症状消失,皮损全部消退,真菌检查阴性;显效为临床症状基本消失,皮损明显消退,真菌检查阴性;好转为临床症状减轻,皮损部分消退,真菌检查阳性;无效为临床症状无变化,皮损未消退,真菌检查阳性.结果:酿酒工人628名和企业行政职员436名均进入结果分析.①皮肤癣菌病的发病情况:酿酒工人628名,患皮肤癣菌病468名(74.52%),企业行政职员436名,患皮肤癣菌病210名(48.23%),两者比较差异显著(P<0.01).②皮肤癣菌病的发病种类:酿酒工人足癣的患病率很高(72.62%),其次是花斑癣(15.35%);企业行政职员足癣患病率也较高(39.52%),其次是体癣(22.38%)和股癣(20.40%).③手足癣的临床分型:酿酒工人和企业行政职员足癣均以角化过度型为多见;而手癣则均以水疱型为多见.④皮肤癣菌病与病原菌的分布关系:病原菌主要是红色毛癣菌.⑤皮肤癣菌患者外用药物疗效观察结果:企业行政职员外用药治疗的有效率(73.33%)高于酿酒工人(54.06%).结论:酿酒企业的生产环境温度偏高而潮湿,酿酒工人易于感染皮肤癣菌病,应加强皮肤癣菌病的预防和治疗,努力改善酿酒的生产环境.
为探讨摘叶对烟台产区赤霞珠葡萄及所酿葡萄酒主要品质的影响,本试验以山东蓬莱的6年生赤霞珠葡萄为试验材料,在转色期(花后70 d)及采收期前10d(花后143 d)进行半摘叶和全摘叶处理,研究不同时期和摘叶方式对赤霞珠葡萄的理化指标、品质指标的影响.结果表明,在不同发育时期摘叶处理都能够有效地提高葡萄果实的成熟度及其葡萄酒的综合品质.其中,花后70 d全部摘叶处理对糖、滴定酸以及pH值的提高效果明显;转色期半摘叶和全摘叶处理后葡萄果实中总酚和单宁含量分别提高了17.96%和50.25%,所对应的葡萄酒中总酚和单宁含量也分别提高了40.18%和54.13%;此外,摘叶处理对赤霞珠葡萄及所酿葡萄酒中香气物质的骨架影响不大,但对香气成分的含量影响较大,转色期半摘叶处理使呈现果香的香气物质含量提高明显;转色期全摘叶处理使葡萄酒中色度提高效果最明显,达到了16.48%;4种摘叶处理均使葡萄酒色调降低,使得葡萄酒颜色呈现淡紫色.本研究对酿酒葡萄赤霞珠在田间管理和提高葡萄酒质量方面提供了理论依据及技术支持.
利用TP-M13-SSR标记技术构建麦芽品种指纹图谱,从163对简单序列重复(simple sequence repeat,SSR)引物中筛选到4对多态性丰富的SSR引物,每对引物的等位基因为3~10个不等,平均每个引物产生6.75个等位基因.在大批量引物筛选的情况下,M13通用引物可大大降低SSR引物进行荧光标记的合成成本.利用4对SSR引物进行麦芽品种DNA指纹图谱构建,得到23个麦芽品种的指纹图谱及指纹数据库.该法检测成本低,方法准确可靠,可实现国内主要麦芽品种的鉴定,为啤酒企业在麦芽采购环节提供技术支持.
玉米Δ12脂肪酸脱氢酶是催化油酸形成亚油酸的关键酶.将其编码基因FAD2(GenBank登陆号:DQ496227)克隆到酿酒酵母表达载体pYES2.0中,构建成重组质粒pYE/FAD2,转化到酿酒酵母进行诱导表达.同时以pYES2.0转化子为对照.气相色谱(GC)分析表明,重组转化子亚油酸的含量占酵母总脂肪酸的1.54%,而对照未检测到亚油酸.表明FAD2基因具有编码△12脂肪酸脱氢酶的功能.为探索转译起始密码子周边序列的改变对FAD2基因表达产生的影响,将该基因的起始密码子上游序列进行修改,构建重组表达载转化酿酒酵母进行表达.GC分析表明,pYE/FAD2-1转化子的亚油酸含量占总脂肪酸含量的8.81%,是对照pYE/FAD2转化子的近5倍.
将多级液液微萃取与气相色谱-质谱联用技术相结合建立了白酒中微量角鲨烯的快速定量方法.将白酒稀释后,用戊烷-乙醚混合溶剂(1∶3,体积比)进行多级微萃取,有机相浓缩后气质联用分析.结果显示,角鲨烯在0.62 ~ 159.88 μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.995 5,角鲨烯的检出限为0.17 μμg/L,当加标浓度为2,20,40 μg/L时回收率分别为78.1%,85.0%和103.5%,相对标准偏差(RSD)分别为12.1%,8.9%和7.0%.该方法具有简便快速、准确灵敏、萃取效率高、有机溶剂消耗少等优点,适合白酒中痕量角鲨烯的定量分析.

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