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纯种酵母发酵酿制善酿酒的工艺研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-20 阅读:152
通过对善酿酒用不同的纯种酵母进行发酵,并以正交试验法对东风黄酒(干型黄酒)、水、纯种酵母的添加量和酵母菌种选择进行研究.结果表明:用纯种酵母发酵酿制善酿酒是可行的,大大缩短了发酵时间:以东风黄酒添加量为112.0%、加水量为25.0%、加纯种酵母量为10.73%和酵母菌株为1#最适宜酿制条件.
目的 构建牛乳铁多肽(Lactoferricin B)的真核表达质粒pYES2/Lactoferricin B,实现其在酿酒酵母S.cerevisiae中的表达,并初步检测其不同变异的体外抗菌活性.方法 通过分别合成Lactoferricin B基因两条单链的部分序列,让其互为模板、引物进行PCR扩增,得到Lactoferricin B与3种变异的基因序列.将它们克隆到穿梭质粒pYES2中,构建pYES2/Lactoferricin B 及3种变异基因重组质粒,转化到大肠杆菌Top10中,让其大量增殖.提取重组质粒经纯化后将其转化到S.cerevisiae中,通过营养缺陷型筛选获得重组酵母菌并通过半乳糖诱导使其表达目的蛋白.经离子交换柱纯化收集目的蛋白后,通过体外抑菌实验比较Lactoferricin B及3种变异重组蛋白的抗菌活性.结果 经PCR扩增检验、DNA测序表明成功构建pYES2/Lactoferricin B与3种变异基因重组质粒.提取诱导后的蛋白进行SDS-PAGE电泳及质谱检测,证实目的蛋白的存在,相对分子质量约为3.4×103.在大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌的抑菌实验中观测到Lactoferricin B和A17-Lactoferricin B产生了抑菌圈.结论 成功构建pYES2/Lactoferricin B及变异基因重组质粒,该重组质粒能在S.cerevisiae中诱导表达目的蛋白,为进一步研究其生物功能及抗菌活性奠定了基础.
目的测定健康人在空腹、饮水、饮啤酒及服吗丁啉后胃电参数的变化,研究不同饮食成分及吗丁啉对胃电参数的影响.方法 10名正常体型(体重指数BMI为22.5kg/m2±2.3kg/m2)健康自愿者,空腹12h,应用三电极Medtronic高分辨多道全胃肠功能监测仪,双电极置于脐与剑突连线中点及由此向右旁开45°距中点5cm处,参考电极置于该中点向右平移10cm处.记录时间为空腹30min,饮水、饮啤酒后各45min,服吗丁啉20mg 30min后再饮水、饮啤酒记录45min .每个受试者需用4天完成实验,即空腹及饮水、饮啤酒及服吗丁啉后饮水、饮啤酒各1天. 饮水、饮啤酒量均为350mL.结果健康人空腹主功率(PDP)346.97±341.37,饮水后786.9±556.26 ,饮啤酒后469.03±513.48,饮水、饮啤酒后PDP比空腹增加,其中饮水后明显增加(P <0.05),服吗丁啉后饮水PDP 945.89±568.64、饮啤酒893.38±538.60,分别比空腹、单纯饮水、饮啤酒PDP增加(P<0.05),饮水与饮啤酒对PDP无明显变化(P<0 .05),服药后饮酒与空腹的功率比(PR1)为9.38±11.85,与服药后饮水与空腹的功率比(PR2)9.97±11.77对比无显著差异(P<0.05).结论健康人饮水后振幅明显升高,饮啤酒后轻微升高,餐后振幅升高与胃收缩有关.吗丁啉可使健康人餐后振幅升高,有促进胃动力的作用,其作用程度与食物成分无关.
重离子辐照通过直接和间接作用导致生物体DNA产生损伤,包括DNA的链断裂、碱基的插入或丢失以及氧化损伤等.DNA损伤直接影响复制、转录和蛋白质合成,同时还是突变的重要原因,因此,DNA损伤修复系统尤为重要.在酿酒酵母中,这些损伤主要是通过同源重组修复(homologous recombination repair,HRR)、碱基错配修复(mismatch repair,MMR)和碱基切除修复(base excision repair,BER)等途径来修复的.作为真核生物研究的模式生物,对于酿酒酵母DNA损伤修复的HRR、MMR和BER途径研究颇多,也不断有一些新的成果出现,特别是对于相关途径的完善和相关蛋白的深化更是研究热点,在此对近年来有关重离子辐照酿酒酵母DNA损伤修复途径方面的研究做一综述.
为了回收高浓度发酵废水中的有用资源,以近平滑假丝酵母(C.parapsilosis)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、产朊假丝酵母(C.utilis)、汉逊德巴利酵母(D.hansenli)、酿酒酵母(S.cerevisiae)、皮状丝孢酵母(T.cutaneum)、白地霉(G.candidum)和黑曲霉(A.niger)8种常见工业菌种为研究对象,通过摇瓶发酵,考察了不同菌种利用高浓度发酵废水生产单细胞蛋白(SCP)的能力,同时比较废水灭菌和不灭菌两种条件对SCP产量的影响.结果表明,在废水COD浓度69 600 mg·L-1、TN浓度4048 mg· L-1、初始pH6.5、28℃、150 r·min-1、灭菌条件下发酵40 h,C.parapsilosis的菌体生物量和粗蛋白含量最高,可达7.04 g·L-1和1.87 g· L-1,对废水中COD和TN的去除率分别为33.5%和20.1%;C.parapsilosis和G.candidum可作为废水生产SCP并高效回收氮素和有机质的优势菌种.在不灭菌条件下,各菌种生产SCP的能力明显高于灭菌条件,且不同菌种产量差异不大,生物量和粗蛋白含量平均高达8.0g·L-1和4.0g·L-1,废水COD和TN的去除率分别为47%和33%.
本发明公开了一种樱桃酱香型白酒及其制备方法,制备时先备料:按照质量百分比称取高粱85?90%、小麦10?15%作为原料,按照质量百分比称取米根霉麸曲18?22%、生香酵母45?50%、乳酸菌麸曲30?35%作为辅料;称取高粱质量3?7%的樱桃备用;润料后在0.4?0.5MPa的压力下蒸料,熟料摊晾后与樱桃混合物混合均匀,与辅料混合均匀后堆积发酵;入窖发酵、蒸馏即得。本发明经过上述工艺制得的白酒具有樱桃香味,酱香好、酒体丰满且香醇绵柔,口味丰富。且本发明制得的白酒含有川芎嗪、甲壳素、麦芽酚、龙脑、2?呋喃甲酸、阿魏酸等等,具有保健功效。本发明减少了再次投入,并使整个生产工艺操作简单、成本低、周期短、易于推广。

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