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苦瓜Mp-21.6蛋白的分离及生化特性

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-16 阅读:104
为研究苦瓜蛋白的有效分离技术与抑菌活性,本实验采用(NH4)2SO4分级分离油苦瓜(Momordica charantia L.)蛋白质,将SephadexG-100凝胶柱在DEAE-52阴离子交换柱色谱上作站上串联,分步聚集纯化出苦瓜蛋白Mp-21.6.SDS-PAGE凝胶电泳显示单一蛋白条带;经生化分析鉴定,Mp-21.6 (Momordica protein of 21.6 kD)蛋白的分子量为21.6 kD,等电点pI=9.6;双向还原SDS-PAGE确定苦瓜蛋白Mp-21.6仅存在链内二硫健;Aacomplement软件的基于氨基酸组成比较发现,Mp-21.6类似于RNMC_MOMCH [Ribonuclease MC (RNase MC,EC=3.1.27.1)].抑菌试验显示Mp-21.6对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aure us)、沙门氏菌(Salmonellab sp)、枯草芽胞杆菌(Bacillus sabtilis)、啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和黄曲霉(Aspergillus flavus)产生明显的抑菌活性,其最小抑菌浓度(MIC)远低于苯甲酸钠.随着苦瓜蛋白的逐级分离纯化,其清除羟自由基和总抗氧化能力均有上升的趋势.研究结果提示,苦瓜Mp-21.6蛋白具有广谱抗菌活性及显著的抗氧化能力,利用区隔性分离方式,分级提纯苦瓜的生物活性蛋白,将能开发出有发展潜力的新型抗菌药物.
为确定东北地区啤酒大麦的最适播种期,促进增产增收.通过啤酒大麦垦啤麦10号播期试验,从产量、蛋白质含量、产量构成因素、生育期、病害发生率等方面分析了不同播期对啤酒大麦产量及品质的影响.结果表明:黑龙江地区垦啤麦10号的最佳播期为4月1日至4月11日.
食用型向日葵杂交种A6是甘肃省农业科学院经济作物与啤酒原料研究所、 甘肃金大农业科技有限公司合作选育的胞质互作型雄性不育三系杂交种,其杂交组合是612A×39R.在2010—2014年甘肃省食用型向日葵多点区域试验中,平均折合产量4680.0 kg/hm2,较对照品种LD5009增产6.66%.在2014年甘肃省食用型向日葵生产试验中,A6平均折合产量4318.5 kg/hm2,比对照LD5009增产9.05%.该品种农艺性状优良,抗倒伏,抗向日葵霜霉病、 黄萎病和白粉病,较耐向日葵菌核病.葵仁粗脂肪含量为291.5 g/kg(干基),粗蛋白含量为178.8 g/kg(干基).适宜在甘肃省沿黄灌区、 河西、 天水及新疆、 内蒙古、 宁夏向日葵种植区推广种植,或在低海拔光照充足地区麦后复种.
采用酿酒酵母的细胞壁包埋水溶性的绿原酸,通过正交试验考察包埋温度、包埋时间、芯材比和加水量因素对绿原酸微胶囊包埋率的影响.结果表明,在包埋温度40℃、包埋时间6h、芯材比3:1(g/g),以6mL蒸馏水为包埋介质的组合条件下,包埋率最大为18.9%.微胶囊红外光谱分析发现绿原酸的特征官能团的振动消失;荧光显微镜观察显示微胶囊呈球形,微胶囊内的绿原酸自发明亮的荧光;高效液相色谱定性分析显示,绿原酸包埋前后保留时间及紫外扫描图谱相一致.研究结果表明绿原酸成功的包埋到酵母细胞壁内,且在包埋过程中没有发生任何化学变化.
双乙酰是啤酒、葡萄酒等发酵酒的重要风味物质之一,是酵母酒精发酵和乳酸菌苹乳发酵时产生的副产物.本研究首先建立了适用于葡萄酒体系双乙酰含量检测的邻苯二胺比色法.在此基础上,分析了葡萄酒发酵和陈酿过程中双乙酰含量的变化.结果表明,随酒精发酵进程,双乙酰含量逐渐增加,在发酵高峰达到最大值;苹乳发酵初期双乙酰含量下降,但后期有所增加;在不锈钢罐陈酿过程中双乙酰含量变化不大.
利用高效液相色谱-质谱联用和气相色谱-质谱联用技术,分析欧亚种葡萄'赤霞珠'(无性系338和685)、'宝石解百纳'和山葡萄品种'双优'、'双红'、'双丰',以及山欧杂种葡萄品种'北冰红'果实中花色苷、黄酮醇、黄烷-3-醇和香气化合物含量和组成的差异.结果表明,山葡萄总花色苷含量远高于欧亚种葡萄,以花色素双糖苷为主,山葡萄未检测出酰化的花色苷;欧亚种葡萄只检测出花色素单葡萄糖苷;山欧杂种葡萄既含有花色素单葡萄糖苷,又含有花色素双糖苷,还含有2种酰化的花色素双糖苷.欧亚种葡萄槲皮素类黄酮醇含量最高,而山葡萄的杨梅酮类黄酮醇含量最高;欧亚种葡萄果皮黄烷-3-醇的平均聚合度高于种子,而山葡萄则相反;山葡萄的C6/C9类挥发性香气物质含量显著高于欧亚种葡萄.通过分析和总结供试品种(品系)果实类黄酮及香气物质含量和组成的差异,这些指标可以为区分欧亚种葡萄、山葡萄和山欧杂种葡萄品种提供参考.

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