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表达鸡α干扰素重组酿酒酵母菌的构建与鉴定

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-02 阅读:364
通过构建鸡α干扰素真核表达载体,以获得能够表达鸡α干扰素的酵母工程菌株.首先根据GenBank公布的鸡α干扰素基因序列设计上、下游引物,以略阳乌鸡基因组DNA为模板,PCR扩增鸡α干扰素基因片段.然后,利用基因重组技术将鸡α-干扰素基因插入真核表达载体,通过菌落PCR和DNA测序确定目标载体,构建成功后转化至酿酒酵母AH109,再通过营养缺陷培养、质粒提取和PCR鉴定带JMB440-ChIFN-α载体的重组酵母菌株.最终通过酵母培养、总蛋白收集、SDS-PAGE电泳和Western blot等,确定鸡α干扰素基因能够与酵母菌株重组,并表达α干扰素,蛋白条带大小约为23 ku,与预期结果一致,表明成功构建了表达鸡干扰素基因的工程酵母菌株.
本发明涉及一种新会柑果肉蒸馏白酒及生产方法,包括以下质量份数的原料:新会柑果肉100份,白砂糖2?5份,发酵物0.25?0.7份。制备方法包括:经过原料挑选、清洁、整理、发酵后,经过两次蒸馏,第一次出酒酒精度平均值为27%~35%Vol.,第二次出酒酒精度平均值为43.9%~65%Vol.。采取与传统浓香型白酒生产工艺相结合的方法,一方面充分利用浓香白酒生产过程存在的有益菌群,另一方面在水果白酒的感官品质上增加了浓香型白酒特有的香味物质与水果发酵香味相得益彰,加工过程直接使用原材料与白砂糖、酒曲进行调配、发酵、蒸馏、勾兑而成,没有添加任何粮食、食品添加剂和催化剂,保证成品酒纯正,主要用于新会柑果肉处理酿酒与柑橘果农柑橘次品、滞销时价值转换。xa0xa0
以酿酒酵母和粟酒裂殖酵母的融合株--自絮凝颗粒酵母SPSC01为研究对象,选择搅拌式反应器为模式系统,利用聚焦光束反射测量仪(FBRM)在线检测了絮凝酵母颗粒的弦长频率分布.研究表明,在含有絮凝缓冲液的模拟系统中,自絮凝酵母颗粒粒径分布符合对数正态分布.粒径分布的特征参数(M)与搅拌转速(r)之间的关系可用对数方程表示,从而简化了絮凝酵母颗粒粒径分布的定量表征.在真实的乙醇连续发酵过程中,细胞代谢生成的CO2对测量体系产生了干扰,利用建立的自絮凝酵母颗粒粒径分布的在线检测和定量表征方法,在数据处理过程中排除了这种干扰,得到了自絮凝酵母SPSC01絮凝颗粒的粒径分布.
采用氯化银比浊法直接测定啤酒中微量的氯离子,研究了测量波长、稳定时间、酸度、稳定剂对结果的影响.最佳实验条件为:检测波长440nm,线性范围0~6μg/mL,方法检测限为0.0321μg/mL.该法测定啤酒中不同浓度微量氯离子的相对标准偏差小于0.5%,加标回收率为97.7%101.3%.结果表明,该法准确、快速、简便,其它的常见离子无干扰,适用于啤酒厂的日常检测.
目的:明确外阴阴道念珠菌病( VVC)患者分离的念珠菌种类及对抗真菌药物的敏感性。方法选取2003年4月—2012年9月就诊于北京大学深圳医院妇科门诊的3141例VVC患者为研究对象。采集念珠菌标本进行培养,采用API Candida鉴定分离菌株,采用Rosco纸片扩散法进行抗真菌药敏试验。结果共分离出3182株念珠菌(从41例患者中分离出两种念珠菌)。其中白念珠菌分离最多,占85.0%(2705株),其次依次为光滑念珠菌(338株)、近平滑念珠菌(49株)、热带念珠菌(31株)、酿酒酵母菌(23株)、克柔念珠菌(15株)、无名念珠菌(11株)、红酵母菌(6株)、鲁希特念珠菌(2株)及土生念珠菌(2株)。白念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、克霉唑及制霉菌素的耐药率分别为1.1%(18/1612)、2.2%(36/1612)、4.2%(68/1612)、0.9%(14/1612)、0。结论白念珠菌是VVC主要致病菌,白念珠菌对抗真菌药物的耐药不常见。
从处理啤酒废水的厌氧流化床的活性污泥中分离纯化到了发酵细菌,并对其培养条件进行了研究,实验表明,该发酵细菌最佳培养温度为37~42℃,最佳培养时间为28 d,同时对其进行了生理生化和形态鉴定.将该发酵细菌反加到AFB反应器中,能有效降低反应器的启动时间,能提高反应器处理啤酒废水的处理效率约8%.

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