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甲基对硫磷水解酶的酿酒酵母表面展示及在甲基对硫磷降解中的应用

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-03 阅读:946
PCR扩增假单胞菌WBC-3的甲基对硫磷水解酶基因,插入表面展示质粒pYD1的多克隆位点,构建pYD1-MPH重组质粒。重组质粒转化酿酒酵母EBY100,2%半乳糖诱导甲基对硫磷水解酶表达,并利用免疫荧光检测甲基对硫磷水解酶在酿酒酵母细胞表面的表达展示。研究了表面展示甲基对硫磷水解酶的酶学性质和酵母工程菌对水体中甲基对硫磷的降解效果。结果表明成功构建具有全细胞甲基对硫磷水解酶催化活性的酵母工程菌,经2%半乳糖诱导48 h,表面展示甲基对硫磷水解酶比酶活力为18.2 U/mg细胞干重。表面展示甲基对硫磷水解酶的最适作用pH为9.5,最适作用温度为30℃,在pH4.0-10.5之间和45℃以下稳定性较好,Mn2+、Co2+、Zn2+、Ca2+、Hg2+、K+、Ni2+对表面展示甲基对硫磷水解酶活性有激活作用,Na+、Fe3+、Ag+对展示酶活力有抑制作用。工程菌在1 h内对淡水中20 mg/L的甲基对硫磷的降解率在80%以上。
本发明涉及固体发酵装置,公开了一种白酒发酵设备,包括座体、蓄水池、料槽、酒液集料筒、搅拌装置和密封箱,蓄水池设置在座体下方,座体下端固定有支架,料槽和酒液集料筒均置于支架上,酒液集料筒设于料槽下方;所述密封箱为双层结构并置于蓄水池中,且料槽设于密封箱内,密封箱外层与内层之间为膨胀腔,密封箱内腔与膨胀腔连通;密封箱下部设有与膨胀腔连通的排气管,排气管上设有压力控制开关;搅拌装置包括驱动轴和转动连接在料槽内的搅拌器,驱动轴与密封箱固定连接,驱动轴与搅拌器通过相互配合且螺旋角大于55o的螺纹进行连接。在发酵时,该设备可对原料自动进行搅拌,并提高原料的散热效率。
为探索啤酒生产废水综合利用的方法和途径,采用液体发酵的方法,从7个酵母菌株中筛选出既能产微生物油脂和菌体蛋白,又能有效降解COD的菌株.考察了优良酵母菌株的发酵周期,并对其所产油脂的脂肪酸组成和菌体蛋白的氨基酸组成进行分析.结果表明:6#菌株——Trichosporon porosum D02、1#菌株——斯达油脂酵母Lipomyces starkeyi 1809对废水的资源化利用程度最高,6#和1#2个优良酵母菌株在发酵120 h时的油脂产量、菌体粗蛋白产量、COD降解率分别达到8.93 g/L、6.1 g/L、89.09%和4.62 g/L、4.42 g/L、81.47%.2个优良酵母菌株所产油脂的脂肪酸组成均以C16和C18系为主,含量最高的为油酸(C18∶1)和棕榈酸(C16∶0),不饱和脂肪酸指数(IUFA)分别达到80.33%和61.57%.除脯氨酸未检出外,2个优良酵母菌株菌体蛋白均含有17种氨基酸,其中8种必需氨基酸占氨基酸总量的比例分别为44.14%和44.23%,可完全充当动物蛋白饲料.
在河西高海拔冷凉区进行了氮肥施用量对啤酒大麦产量和品质的影响试验,结果表明,当施纯氮量为120kg/hm<'2>时,啤酒大麦产量达最高,为6 040.0 kg/hm<'2>,蛋白质含量为130.4 g/kg,饱满粒高于80%.
本发明涉及白酒糖化发酵技术领域,公开了一种用于白酒制备的糖化发酵装置,糖化釜的上表面中心位置处安装有搅拌组件,支撑板的内侧安装有连接板,连接板的一侧固定安装在消毒组件的一侧,消毒组件的内部安装有发酵箱,发酵箱的上表面固接有连接组件。通过设置连接组件,使得将糖化釜与发酵箱进行一体式安装,避免了糖化后通过人工转移到发酵箱中,在转移过程中容易增加了被空气污染的可能性,影响白酒的发酵;通过设置搅拌组件,使得糖化的效率更快,进行的更加充分快速;通过设置消毒组件,对发酵箱的内部进行消毒,防止发酵过程中污染了杂菌或者噬菌体,会影响发酵过程的进行。
啤酒用淀粉糖浆在国内逐渐受到重视,具有广阔的开发应用前景,是目前国内淀粉糖工业又一新的增长点.本文介绍了国内啤酒酿造用淀粉糖浆的分类、组分、特点、生产工艺及实际应用等方面的情况.

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