β-1,3-1,4-葡聚糖酶在工业酿酒酵母表面的诱导展示表达研究

基于絮凝素FL01基因片段为锚定序列,构建以诱导型GAL1启动子介导的表达栽体YEP-GMPFAK,并实现以半乳糖为诱导剂,β-1,3-1,4-葡聚糖酶在酿酒酵母表面的展示表达.酵母转化子发酵实验表明,在pH6.0、50℃培养条件下,经2%半乳糖诱导24 h,表面展示酶活达到最大值322.83 U/g细胞干重.酶学性质测定表明,展示表达的β-1,3-1,4-葡聚糖酶具有良好的热稳定性.
通过对酿酒葡萄园中主要危害鸟的种类及危害特点进行调查与分析,发现鸟害的发生状况与葡萄品种、栽培方式、栽培区域的自然环境条件密切相关.
宁夏贺兰山东麓地区是我国著名的优质酿酒葡萄新产区,2003年4月被国家批准为原产地域保护产区.由于酿酒葡萄收购价格连年下降致使种植业陷入困境.本文调查分析了酿酒葡萄园的投资与管理成本,旨在引起人们的广泛关注以扶持和维护这一新兴产业的发展和稳定.
利用实时荧光定量PCR技术(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测0.1%甲醛交联RNA免疫共沉淀(RNA Immunoprecipitation,RIP)富集SF2蛋白相互作用的RNA效率,为研究可变剪接因子SF2相互作用RNA的富集效率提供准确的质检方案.采用RIP技术获取HeLa细胞中SF2蛋白相互作用的RNA,等比例加入外源酿酒酵母(BY4741)RNA,并以其 β-actin作为内参基因,利用qPCR检测RIP富集SF2蛋白相互作用RNA的效率.结果显示,0.1%甲醛交联RIP技术特异性捕获得到SF2蛋白-RNA复合物;qPCR技术检测阳性基因PABP、Srsf1在SF2抗体捕获的产物和IgG抗体的产物中相应RNA的浓度差异均在60倍以上.利用qPCR技术,以外源酿酒酵母(BY4741)RNA作为内参,能快速、准确定量检测RNA的富集效率.
以海藻糖高产菌株啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae S2．1416的cDNA克隆为模板，根据国外报道的序列，设计适当的引物，利用PCR技术，克隆出大约1．5kb的片段。PCR产物经低溶点胶纯化，与PBluscript载体连接并转化大肠杆菌DH-5α，阳性重组子经酶切鉴定，表明已获得海藻糖磷酸酶基因PCR产物及其克隆。
茶啤酒是在啤酒酿造过程中加入茶或茶提取物得到的兼具茶与啤酒双重风味的新型啤酒。茶啤酒的开发不仅可以丰富啤酒的种类、风味和生理功效等，还可以提升茶叶资源的附加值和利用率，有助于促进茶与啤酒产业的共同发展。然而，茶啤酒在原料处理、发酵工艺和澄清技术等方面的研究尚不成熟。本文结合了近年来茶啤酒相关研究，系统总结茶啤酒原料的前处理、发酵和澄清等技术的相关研究成果，并对未来的研究方向进行了展望，旨在为茶啤酒的深入研究和发展提供参考。