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酿酒酵母ScCoA-△9脱氢酶种子特异表达载体构建及在棉花中的功能验证

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-05 阅读:392
[目的]提高棉籽油中的有益单不饱和ω-7脂肪酸(如棕桐油酸),减少易氧化、加工产物对人体健康不利的亚油酸(约54%)等有害脂肪酸.[方法]本文亚克隆了酿酒酵母ScCoA-△9D基因并构建了种子特异性表达载体,并利用农杆菌浸染棉花下胚轴.[结果]经过一系列组培实验诱导分化出转基因棉花幼苗,并且通过草铵膦抗生素筛选后,PCR鉴定两个表达盒基因成功整合进入棉花基因组中,并获得阳性转基因幼苗;叶片表达分析表明,该基因在大豆种子特异性启动子驱动下表达较低,明显低于CaMV35S启动子驱动下Bar(草铵膦)基因的表达量.[结论]本试验为高棕榈油酸棉花后续育种研究提供了坚实的理论和实验技术基础.
利用红曲霉发酵生成的酯化酶液,催化酿酒尾水中的有机酸和醇,来制备含酯量较高的酯化液.本研究采用液态发酵法制备酯化酶液,添加到酿酒尾水、乙醇、己酸的混合液中,在一定条件下进行酯化反应,以混合液总酯含量和各有效成分含量为指标,设计单因素实验考察影响酯化反应因素的范围,采用正交设计实验优化各酯化反应的条件.正交实验所得的最优条件为乙醇添加量为10%、酯化酶液添加量为9%、己酸添加量为1.5%、酯化反应温度为35℃,在此条件下混合液中总酯的含量达137.01 mg/100 mL,其中己酸乙酯含量高达222.71 mg/L,乳酸乙酯的含量由92.93 mg/L下降到74.61 mg/L,乳酸乙酯与己酸乙酯的比值小于1.所得酯化液适合用于白酒的勾调,不仅大幅提高了酒体中总酯含量,还减少了乳酸乙酯对主体香型的抑制和青涩杂味,使酒体香气更为突出协调.
一种白酒储存容器,包括瓷坛和坛盖,所述瓷坛的内表面粘贴有裱糊层Ⅰ,瓷坛的外表面包覆有荆条编织层,且荆条编织层的内表面粘贴有裱糊层Ⅱ;所述坛盖的外表面粘贴有裱糊层Ⅲ,且坛盖密封插盖在瓷坛的上端口中;所述裱糊层Ⅰ的内表面涂覆有一层蛋白胶,所述蛋白胶层的内表面涂覆有一层蜂蜡;所述裱糊层Ⅲ的外表面涂覆有一层蛋白胶。本实用新型将酒海与酒坛结合在一起,酒坛包覆在酒海中,并且对酒坛内表面进行了处理,对酒海内表面进行了加固,不但外观看起来像小酒海,古色古香,而且酒海对酒坛具有一定的保护作用,防止磕碰碎裂,便于移动和运输,又利于酒的熟化增香,适于长期贮存,贮存时间越长,品质越佳。
目的:探讨双歧杆菌(Bifidobacterium)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)原生质体融合子的筛选方法.方法:将双歧杆菌和酿酒酵母原生质体进行原生质体融合,采用10%乳糖中性红培养基进行融合子的初筛,并分析融合子传代稳定性、生物学特性,采用双歧杆菌属特异性寡核苷酸探针对亲本菌和融合子进行了荧光原位杂交检测比较.结果:结果表明,筛选得到的融合子具有双歧杆菌的特异性序列和亲本菌的生物学特性.结论:双歧杆菌和酿酒酵母原生质体融合,实现了厌氧菌和酵母的跨界融合,为双歧杆菌生物学功能的开发提供新思路、新途径.
乳杆菌被广泛用于含有碳水化合物的动植物发酵产品中。该属细菌分解糖的能力强,分解蛋白质类的能力极低。乳杆菌耐酸,最适PH值为5.5~58,甚至更低。其在自然界中分布很广,在植物体表、乳制品、肉制品、啤酒、葡萄酒、果汁、麦芽汁、发酵面团、污水以及人畜粪便中,均可分离到。
SKP1蛋白是茉莉酸信号途径关键环节之一的SCFCOI1复合体的成员,在CUL1和COI1之间起连接作用.本文采用RT-PCR和RACE技术,从巴西橡胶树无性系热研7-33-97的胶乳中克隆了HbSKP1基因.该基因全长778 bp,含一个543 bp的开放阅读框,鳊码180个氨基酸.生物信息学分析表明,推导的HbSKP1氨基酸序列含有SKP1家族特征性的Skp1-POZ和Skp1结构域.HbSKP1与蓖麻、毛果杨、拟南芥、油棕、啤酒花、苜蓿的SKP1类蛋白的氨基酸序列同源性分别为64%、61%、47%、47%、47%和47%.原核表达了HbSKP1-His(6)融合蛋白.本研究为进一步鉴定乳管细胞中茉莉酸途径核心环节SCFCOI1,复合体打下良好基础.

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