番茄红素是一类在食品、医药等领域具有广泛应用价值的萜类化合物.异戊烯基焦磷酸异构酶(isopentenyl diphosphate isomerase,IDI)是番茄红素合成途径中的关键酶,也是代谢工程改造的主要靶点.本研究为了系统比较不同来源IDI对重组大肠杆菌番茄红素(Lycopene)产量的影响,分别克隆了原核微生物、真核微生物、植物、古菌等多种来源的Ⅰ型及Ⅱ型异戊烯基焦磷酸异构酶(IDI)基因,在大肠杆菌E.coli中异源表达,在加强自身2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)代谢途径的背景下,通过优化多靶点组合及转化时间提高番茄红素的合成水平.结果表明酿酒酵母来源的Ⅰ型IDI(ScIDI)及枯草芽孢杆菌来源的Ⅱ型IDI (BsIDI)在经优化的背景下可以获得最高的番茄红素产量,产量分别达到9.96 mg/g DCW,8.78 mg/g DCW,番茄红素积累在转化8h达到最高,最高能达到10.29 mg/g DCW.本研究最终确定了不同类型IDI发挥功能的条件,为后续番茄红素以及萜类化合物的代谢途径的改造提供依据.
主要研究了泡沫活性蛋白质中最重要的Z4蛋白的分离提纯,并利用蛋白免疫印记法(Western Blot)以及质谱(Mass Spectrometry)鉴定Z4蛋白质.此外,还探讨了Z4蛋白质的含量在酿造过程中的变化.实验结果表明,Z4蛋白质的pI值为5.5～6.0,分子质量为43ku,其抗体鉴定Z4有很高的相关性.在酿造过程中,泡沫活性蛋白质发生了很大的变化.
本发明公开了一种白酒的勾兑方法，该方法包括：原度酒的制备、原度酒的调配、降度包装。使用本方法勾兑白酒能使酒体中的各种香味达到一种新的平衡，可以根据区域的不同进行调制，使酒中各种微量成分配比适当，达到该区域人群对白酒标准要求和理想的香味感觉及风格特点。
花生油中亚油酸(LA,C18:2Δ9,12)含量很高,为了研究花生Δ12脂肪酸脱氢酶(Δ12 FAD)的功能,用RT-PCR方法从花生未成熟种子中扩增出AhFAD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转化酿酒酵母K601,得到工程菌Kp4AFAD2B.气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16:2Δ9,12)和亚油酸(C18:2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16:1Δ9)和油酸(C18:1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18:1Δ9,还具有催化16碳的C16:1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16:2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18:1Δ9.
从啤酒厂废酵母直接提取微生物絮凝剂,与水合氧化铁微颗粒体系集成应用于混凝脱色,其脱色效果与无机微颗粒体系的电荷密度、微生物絮凝剂剂量有关,提出无机微颗粒与染料集合体的"剩余电荷"的概念解释微生物絮凝剂-阳离子型无机微粒体系的混凝机理.结果显示微生物絮凝剂-水合氧化铁微粒体系混凝脱色在试验范围内均有显著的协同效应,直接黄最高脱色率达到95.5%,分别比单独使用水合氧化铁微粒和微生物絮凝剂提高33.6%和82.6%.
近年,随着基因工程技术的日益发展,酿酒酵母在分子生物学研究方面的应用越来越广泛.本文介绍了后基因组学用于酿酒酵母的方法,并概述了利用该手段对试验菌株与商业酿酒酵母进行生理功能分析、研究和改造的最新进展,展示了后基因组时代对酿酒酵母的影响及综合基因组信息、生物信息学和分子生物学技术的研究策略.最后,展望了现代生物技术手段在葡萄酒工业中的应用前景.
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