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桑葚果园中酿酒酵母的分离鉴定及特性研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-24 阅读:468
从桑葚果园中分离得到74株酵母,通过产气实验、TTC显色反应初筛,产酒精能力复筛得到最优菌株Y2.通过WL培养及26S rDNA序列分析,鉴定其为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae.菌株Y2在28℃ 、pH 3.5时生长最佳,能耐受体积分数为12% 乙醇,800 mg/L SO2.菌株Y2产酯能力较优,相比于商业酿酒酵母BV818,SLB,发酵桑葚酒风味物质酯类物质相对含量分别比BV818、SLB高2.63% 、5.13%,所产桑葚酒风味优良,香气浓郁,对桑葚果酒的生产及桑葚产品开发具有潜在的应用价值.
用6.9%大骠马乳油750 g/hm2和40%燕麦畏乳油2 250 g/hm2防除啤酒大麦田野燕麦的试验结果表明,两种药剂均有良好的除草效果,防效分别为91.6%、87.5%.以6.9%大骡马乳油750 g/hm2的除草效果较优,且省工省时,安全经济.
分别采用分光光度法、菌体量法以及孔扩散法研究了ε-聚赖氨酸对细菌和真菌的抑菌活性及ε-聚赖氨酸浓度、pH值和温度对其抑菌活性的影响.结果表明,ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黄曲霉、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、保加利亚乳杆菌等6种供试微生物均有一定的抑制作用,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、保加利亚乳杆菌抑制效果较好,对黄曲霉较差;对各种菌的最小抑菌浓度(MIC)为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、保加利亚乳杆菌12.5 mg/L;枯草芽孢杆菌25 mg/L;酿酒酵母800 mg/L;黄曲霉1600 mg/L.ε-聚赖氨酸的抑菌活性随其浓度的增加而增强,热稳定性非常好,能耐100℃的高温,在pH5~8抑菌活性最强,与甘氨酸、Nisin都有协同增效的作用.
本发明公开了一种粮食型白酒原料配方,所述的粮食型白酒原料配方由下列重量份的原料制成:高粱20?22%,大米26%,糯米15?16%,小麦24?27%,玉米8%,小米3?6%。发明的目的是克服现有技术的不足,原料由高粱、大米、糯米、小麦、玉米和小米组成,酿出来的白酒,酒香清雅,入口柔绵,落口甘冽,回味怡畅,香味协调,尾净余长,且酒后不上头。
以含有大豆Sali3-2 cDNA的重组载体为模版,扩增出SALI3-2蛋白及其缺失信号肽的SI cDNA片段,构建酵母表达载体pYES2/S、pYES2/SI以及可表达SALI3-2-His6的pYES2/SH.空载体pYES2/ct和重组载体在转化酿酒酵母INVSC1后得到相应的酵母重组子INV/CK(对照菌)、INV/S、INV/SI和INV/SH.Western blot实验结果表明,SALI3-2蛋白在酵母INVSC1中可被半乳糖诱导表达.对INV/CK、转基因的重组菌INV/S、INV/SI在无胁迫、含1.5mol/L NaCl或山梨醇培养基中的生长情况进行分析.结果表明,大豆SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达对无胁迫条件下酵母的生长没有影响,而在NaCl胁迫下可明显提高酵母转化子的耐盐能力.信号肽的缺失使SALI3-2蛋白的耐盐能力有所下降,可见信号肽对该蛋白耐盐功能的发挥有重要作用.另外,SALI3-2蛋白及其缺失多肽SI的表达不能提高酵母重组子的抗渗透能力,表明SALI3-2蛋白对细胞不具有明显的渗透胁迫调节作用.
对绿色木霉接种到啤酒糟固态发酵产纤维素酶的培养基和培养条件进行优化,考察发酵物料起始含水量、发酵时间、起始pH值等发酵条件,以及啤酒糟培养基中添加麸皮、氮源种类对产酶的影响.结果表明,以啤酒糟为发酵基质接种绿色木霉生产纤维素酶是可行的.经单因素和正交试验获得最适固态发酵的培养条件为:起始pH 5~6,培养温度28~30℃,发酵4d;最佳发酵培养基组合为:麸皮比例30%,培养基起始含水量50%,(NH4)2SO4添加量为2.0%~2.5%.

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