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23株酿酒酵母ISSR指纹图谱分析及SCAR标记的建立

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-26 阅读:460
目的:构建酿酒酵母菌株的简单重复序列间多态性指纹图谱数据库并建立序列特异性扩增区(sequencecharacterized amplified region,SCAR)标记技术,为酿酒酵母菌株的分类、遗传亲缘关系鉴定及菌种专利保护提供可靠的DNA分子标记技术依据.方法:在简单重复序列间多态性(inter-simple sequence repeat,ISSR)指纹数据分析基础上进行聚类分析并对菌种进行分类鉴定,同时将酿酒酵母菌株9号和15号中扩增获得的ISSR特异性DNA带转化为可以直接用于菌株快速鉴定的SCAR分子标记.结果:构建23株酿酒酵母的ISSR指纹图谱,并在相似系数为0.85水平上将23个供试菌株分为3大类,其中,1、2、4、7、15、16、17、19、20、21、23聚为第一类;10、11、12、13、14、18号菌株聚为第二类且10号和11号菌为同一菌株;3、5、6、8、9、22号菌聚为第三类且属于同一菌株.此外,利用所获得的2个特异性条带成功转化为序列特异性扩增区分子标记.结论:在生产上酿酒酵母菌株遗传背景差异不大,常存在同物异名现象,而采用ISSR指纹及其SCAR分子标记技术快速鉴定酿酒酵母菌株在工业生产上具有重要意义.
本发明公开了一种白酒中多种生物胺的定性与定量方法,属于白酒分析检测技术领域。本发明利用液液萃取富集白酒中的生物胺,气相定性与液相定量均需要衍生,气相选用的衍生剂为TFAA,液相采用的衍生剂为丹磺酰氯柱前衍生。本发明建立的方法在白酒中首次定性到9种生物胺,定量方法检测限可低至10μg/L左右,线性相关系数大于0.99,回收率为80.19%~104.05%,相对标准偏差在4%以内。说明白酒中的生物胺可以利用该方法检测,可行性好,精密度高。
本文通过对酿酒酵母在温和NaCl预处理后获得砷幽以及用qRT-PCR技术对几个相关基因的转录水平进行了研究.结果如下:酿酒酵母BY4743经1.5 MNaCl预处理30 min后,可以获得对55℃高温或3 MNaCl的耐性,但是无法获得对高温和高浓度NaCl的多重耐性,表明高温和高浓度NaCl产生了累加的胁迫作用;qRT-PCR的结果表明,胁迫响应基因的表达对酵母获得耐性起重要的作用.
从杨梅果园周边环境及杨梅自然发酵醪中共分离得到152株酵母菌,通过TTC显色法、杨梅汁杜氏管法及三角瓶发酵法进行三级筛选,共得到4株酵母在产气性能、色泽及风味方面比较突出,分别为110号、147号、151号及152号,经过分子生物学鉴定,确定4株菌分别为克鲁弗毕赤酵母、有孢汉逊酵母、库德里阿兹威氏毕赤酵母和酿酒酵母.将筛选到的4株酵母进行耐受性测试,其中152号耐受性最好,在酒精含量18% vol、SO2含量250 mg/L、糖含量50%和pH1.5的条件下均有较好的产气性能,非常适合杨梅果酒的酿造;110号、147号和151号可用于生产低醇果汁饮料、酿造低酒精度果酒或与产酒力高的果酒酵母混合发酵时增香.
采用高效液相色谱法,系统研究了不同降解菌及其多元混配在土壤中对氯嘧磺隆的降解作用.结果表明:真菌黑曲霉、青霉、F8和F31酿酒酵母在土壤中对氯嘧磺隆的降解速度存在显著差异,而且均能加快氯嘧磺隆的降解速度,其降解能力黑曲霉>F31>青霉>F8.黑曲霉分别和青霉、F8、F31混合后,各处理间差异显著,并且随着黑曲霉比例的增加,对土壤中除草剂的降解能力明显增强,其中F31和黑曲霉混合后效果最佳,降解率可达86.43%.对降解菌进行三元混配后发现,在二元复合的基础上添加少量青霉可进一步提高降解能力.
根据基因表达数据的特点,提出一种高精度的基于密度的聚类算法DENGENE.DENGENE通过定义一致性检测和引进峰点改进搜索方向,使得算法能够更好地处理基因表达数据.为了评价算法的性能,选取了两组广为使用的测试数据,即啤酒酵母基因表达数据集对算法来进行测试.实验结果表明,与基于模型的五种算法、CAST算法、K-均值聚类等相比,DENGENE在滤除噪声和聚类精度方面取得了显著的改善.

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