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重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-05-29 阅读:329
以酿酒酵母为宿主菌株,重构其体内代谢途径,生物合成瓦伦西亚烯及其衍生物.该研究在酿酒酵母菌株中引入来源于纯天仙子的细胞色素P450单加氧酶(cytochrome P450 monooxygenase,HPO)、来源于黄扁柏的瓦伦西亚烯氧化酶(valencene oxidase,CnVO),并构建了它们对应的4个突变体HPOM、CnVO-3、CnVO-4、CnVO-34,与来源于拟南芥的细胞色素还原酶(cytochrome P450 reductase,AtCPR)组合表达,通过静息细胞试验,筛选得到表达HPO和HPOM的菌株催化瓦伦西亚烯的效果最优,选取HPOM作为后续试验的基础.进一步引入来自黄扁柏的瓦伦西亚烯合成酶(valencene synthase,CnVS),过表达醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH1),截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(truncated 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase,tHMG1).最终获得1株原位生产瓦伦西亚烯及其衍生物的重组酵母菌株PK2-24,进行3L发酵罐的发酵试验,158 h后总萜产量达310.94 mg/L,较原始菌株提高了111倍.该研究为利用酵母规模化生产瓦伦西亚烯及其衍生物奠定了重要基础.
本文介绍了甜蜜素(Sodium Cyclamate)的物理化学性质和国内外使用情况;对国标GB/T 5009.97-2003<食品中环己基氨基磺酸钠的测定>所规定的检测方法进行了论证,指出采用该标准检测蒸馏白酒中的甜蜜素是不适宜的;为此,课题组建立了LC/MS 法和离子色谱法(IC)检测蒸馏白酒中甜蜜素;按照GB/T6379.1-2004(ISO 5725-1:1994 IDT)的要求对所建立的方法实施了全面的确认;论述了如何正确使用检出限、定量限、线性范围、准确度、正确度、精密度等概念;总结了课题特点.
本实用新型公开了一种白酒生产用拌料装置,包括支撑腿、冷却环和罐体,所述支撑腿上端设置有所述罐体,所述罐体外侧设置有所述冷却环,所述冷却环一侧设置有冷却进水管,所述冷却进水管上设置有阀门。有益效果在于:本实用新型通过设置的导管和酸碱度检测仪,使得白酒在酿造的过程中,可以实时测量酒的酸碱度,保证酒的生产质量。
本发明公开了一种白酒的弱碱化工艺,工艺过程包括:在常温下,首先磁化排酸,将酸性白酒通过磁化排酸装置进行磁化排酸处理,使普通酸性白酒变成磁化中性酒;接着,将磁化中性酒通过碱性酒的处理装置进行弱碱化,使之成为符合要求的碱性值范围的弱碱性白酒;再接着进行负离子氧化,使弱碱性白酒醇化,变得更醇香,口感更好;最后进行装罐。由于采用将酸性白酒先磁化排酸,接着弱碱化的工艺,使得磁化后的白酒中的因水的分子团变小,从而加快了弱碱化进程,经负离子氧化的工艺将白酒醇化,使酒的醇香更浓,口感好。
为建立及优化啤酒大麦SSR分子标记PCR反应体系,以35个啤酒大麦品种(系)为试验材料,利用L16(44)正交试验设计研究DNA、Taq酶、dNTPs及引物浓度对啤酒大麦SSR扩增效果的影响.结果表明:模板DNA 2.0 ng、10×PCR buffer 1.0μL、dNTPs 0.6μL、引物(0.25 mmol·L-1)1.5 μL、Taq酶(2.5U·μL-1)0.45 μL的扩增效果最优,扩增结果重复性好且稳定.
以发酵度较高、凝絮性较差的啤酒酵母菌株H38的原生质体为受体,以凝絮性较强、发酵度较低的啤酒酵母菌株N1热灭活的原生质体为供体进行融合.用正交试验法分别优化两亲株的原生质体制备和再生的条件以及原生质体融合的条件.用制霉菌素抗性为遗传标记选择融合子.融合子初筛时以凝絮性为指标,复筛时以发酵度和发酵液中的主要风味物质的含量为指标.对得到的融合子进行了异核体和遗传稳定性的检验,结果得到两株凝絮性以及发酵特性较好的菌株HN31和HN40.

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