一株野生酿酒酵母的分离鉴定及发酵分析

本试验从玫瑰香葡萄酒自然酿造过程中筛选分离出一株野生酵母菌，经菌落形态观察及分子生物学鉴定为酿酒酵母，命名为Yeast1。对Yeast1进行乙醇耐受性分析，发现Yeast1能够耐受16%（v/v）的酒精度。Yeast1发酵葡萄汁结束后，残糖量、酒精度、挥发酸、总酯和总酸含量分别为3.627011 g/L、8.5%、、0.21084 g/L、1.2644 g/L和4.1603 g/L，分析表明Yeast1发酵力强，速度快，酒精产量较高，残糖量符合酿造干型酒的要求，满足正常的发酵需要。此外，从Yeast1葡萄汁发酵液中共检测到50种香气成分，其中醇类18种、酯类13种、醛类7种、其他酸烯酮醚等物质12种。以上结果表明，昌黎产地玫瑰香葡萄自然酿造中存在较好性能的天然酵母，若将其合理利用可能会酿造出更优质、更具特色的葡萄酒。
本实用新型的目的是为了解决现有的对白酒酿造比较复杂的难题，公开了一种改良白酒酿造工艺用加工设备，包括搅拌系统、盛放筒、加热杆、手柄、连接架、底板、支撑杆、水泵、导管、第一转轴、套环、螺旋弹簧、导向环、导杆、第一电机、盛料管、搅拌杆、连接块、滑板、第二转轴、定位环、网管、端盖、第二电机、固定环和顶杆。本实用新型一体成型，在放入发酵罐之前对玉米粒加工的前序工艺进行完成，从而更易实现对白酒酿造的加工，且设计合理，操作方便，符合白酒酿造领域的需求，值得进行推广。
本发明涉及浓香型白酒的蒸粮方法，属于酿酒领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种浓香型白酒的蒸粮方法，该方法可以使蒸粮的粮糟质量更稳定。本发明浓香型白酒的蒸粮方法包括如下步骤：a、润粮：粮食加水润粮；b、配料：将润粮后的粮食、出窖糟醅、糠壳混匀，得到上甑糟醅；其中，粮食与出窖糟醅的质量比为1∶3～6，糠壳用量为粮食质量的15～30％；c、上甑蒸粮1.5～2.5h，得到粮糟；其中，出窖糟醅水分百分含量X、上甑糟醅水分百分含量Y、润粮用水与粮食相比的质量百分数Z的关系式为：Y＝(0.742～0.772)X+(0.086～0.088)Z+(3.904～4.364)。
为突破部分微生物在榨菜高盐环境难培养的局限,建立一种准确定量榨菜腌制过程中细菌和真菌数量的方法,并探讨动态变化过程.植物乳杆菌ATCC 8014的16S rRNA基因和酿酒酵母ATCC 9763的ITS基因分别与质粒载体连接作为标准参照物构建标准曲线,建立实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)方法,检测3个腌制时期腌制汁液中的细菌和真菌数量,同时检测理化指标.结果表明,所得qPCR标准曲线相关系数R2>0.99,扩增效率E均在95％ ～105％.腌制过程中,细菌和真菌分别在108.10～1010.43和105.29～107.75 copies/μL内变化,细菌在3个腌制阶段都有明显增殖,真菌仅在第3腌制阶段有明显增殖;腌制汁液中,pH值不断下降,NaCl的质量浓度和酸度主要在第2、3阶段先升高后下降.该结果为榨菜微生物过程控制提供参考数据.
清酒酿酒酵母是清酒生产过程中的关键微生物，发酵过程中逐渐积累的酒精会对酵母细胞产生毒害作用，从而抑制了细胞的生长代谢和更高浓度酒精的形成。因此，对酵母细胞酒精耐受机理的研究，为筛选、构造高产酒精和高酒精耐受性酵母茵种提供理论基础。本文从细胞壁、细胞膜、热休克蛋白、贮藏性糖类、氨基酸等方面阐述酵母细胞酒精耐受机理，并在细胞生理学的基础上分析清酒酵母具有较高的酒精产率和相对较差的酒精耐受性的原因。
通过调节类泛素和热激响应介导的酿酒酵母内部的活性蛋白质平衡，提高酵母细胞的热稳定性和乙醇发酵性能，从而达到工业生产中降低控温能耗的目的。将5个蛋白质平衡相关基因分别与调控基因FBA1p组合构建耐热元器件，并将其导入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae INVSC1，通过梯度升温培养筛选得到能赋予酵母细胞较好耐热性的类泛素元器件 FBA1p-atg8和热激蛋白元器件 FBA1p-hsp104；其对应的工程菌 S.c-ATG8和S.c-HSP104在40℃恒定培养下，OD660值均比对照高50%以上（84 h），细胞存活率分别是对照的1.64倍和3.01倍（72 h），且都具有较好的细胞壁完整性及海藻糖合成量。将atg8与hsp104组合构建成双功能耐热元器件，其工程菌 S.c-ATG8-HSP104在40℃恒定发酵的生长能力、细胞活力和乙醇生产能力都明显优于 S.c-ATG8与S.c-HSP104。结果表明，通过类泛素介导与热激蛋白响应协同调节胞内活性蛋白质平衡可以有效地提高酿酒酵母的热稳定性。