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脆壁克鲁维酵母KfADE5,7基因的克隆及其5'非编码区结构与功能研究

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-19 阅读:638
通过补偿乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)KlADE5,7基因突变,从脆壁克鲁维酵母(Kluyveromyces fragilis)基因组文库中克隆了KfADE5,7基因.该基因全长4975bp,编码793个氨基酸,氨基酸序列与已知的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)ScADE5,7基因编码区有68.3%的同源度.利用KfADE5,7-lacZ融合基因,对5'非编码区进行缺失分析,发现了具有完整启动子功能的区域,在启动子上游还发现了两个增强转录和两个减弱转录的区域.
垦啤麦12(红09-818)属春性二棱啤酒大麦品种,由黑龙江省红兴隆农科所用春系03017做母本,北育39号做父本,经有性杂交育成.2015年1月通过黑龙江省品种审定委员会审定.该品种经2012、2013年区域试验,平均产量为4164.1 kg/hm 2,比垦啤麦7号增产8.4%.2014年进行黑龙江省生产试验,平均产量为3668.0 kg/hm 2,平均增产11.3%.经中国食品发酵研究院2012—2013年化验,其籽粒和麦芽品质较优.
在2.6L全自动发酵罐中对人α2a干扰素重组酵母的补料分批培养过程作了初步研究.结果表明,培养过程中待葡萄糖耗尽时流加葡萄糖,并维持低糖浓度;在培养10h~20h时,恒速流加20mg/L的腺嘌呤,能较大幅度提高表达水平,生物活性从原工艺的3.1×109IU/L提高至1.3×1010IU/L.表达期pH值对生产水平有很大影响,宜控制在5.0~5.3.
针对以往啤酒巴氏灭菌机PU控制过程中偶然出现的控制系统与Wincc之间偶尔出现通讯冲突的问题,提出了基于OPC和Wincc的啤酒巴氏灭菌机PU自动控制系统;用VC++编写OPC客户端,并以Wincc作为OPC服务器,实现Wincc与vC++客户端的数据交换.为了实现PU的智能控制,首先建立隧道式杀菌机啤酒PU值与喷淋嘴温度之间的数学模型;并且用高级语言编写啤酒杀菌过程中的PU控制算法;对经OPC通道传入PU控制系统的实时数据进行模拟、分析、计算出控制各温区的喷淋嘴温度值;最后再将控制数据传送给底层设备,达到对啤酒杀菌机实时自动控制调节的目的.运行试验表明,基于OPC和Wincc的啤酒杀菌机PU控制系统能够有效地对杀菌过程中的喷淋嘴温度进行控制并提高杀菌准确度,也提高了啤酒杀菌过程中的效益.
为给北方地区啤酒大麦的引种及新品种选育提供依据,利用从法国引进的2个秋播啤酒大麦品种,研究其不同播期、密度与产量的关系及在保定地区适应性,以明确产量与播期、密度的关系,并筛选适宜该地区生态条件的优良大麦品种.结果表明:晚播可明显缩短品种生育期,易造成分蘖数、穗数和千粒重降低,以致品种产量水平下降;随播种密度增加,分蘖数、穗数增加,但单株分蘖数、单株穗数、穗粒数、千粒重减少.选择适宜的播期和密度对大麦品种获得高产至关重要.Vannesa品种在生育期及产量性状上均优于Sunrise品种,适合在该地区种植,且具有可直接利用于生产的可能性,其适宜播期在10月3号左右,密度100~150粒/m2.
以啤酒生产废水及添加一定的营养因子为发酵基质,采用单因素和正交试验设计对斯达油脂酵母(Lipomyces starkeyi 1809)发酵产油脂和COD降解的培养基进行了优化,并利用气相色谱分析比较了菌体油脂的脂肪酸组成.结果表明:最佳培养基组成为在啤酒生产废水中添加碳源和氮源的C/N为55∶1(即木糖28.88 g/L和硫酸铵1.0 g/L),FeCl3·6H2O3 mg/L,色醇150 μmol/L(在发酵36 h时添加),初始pH 5.5;用此培养基在摇床转速120 r/min、温度28℃下培养斯达油脂酵母120 h,菌体生物量、油脂产量、油脂含量和废水的COD降解率分别达到12.28 g/L、4.40 g/L、35.80%和50.32%,生物量和油脂产量比优化前分别提高了137.98%和117.82%,所产菌体油脂的不饱和脂肪酸指数( IUFA)达到63.95%,其中油酸的相对含量高达56.29%,比优化前提高了5.45%,优化效果显著.

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