人脂联素在大肠杆菌中的可溶性表达

为了提高重组人脂联素在大肠杆菌中的可溶性,构建和表达了增溶标签与人脂联素的融合表达栽体.这些标签包括大肠杆茵硫氧还蛋白和NusA蛋白、酿酒酵母SUMO蛋白和噬热海洋茵Thermotoga maritime 的红素氧还蛋白.结果显示,所有的人脂联素融合蛋白在大肠杆茵中都获得了高水平的表达,但可溶性存在很大差异,说明不同融合标签对人脂联素可溶性表达的促进作用不同.其中,红素氧还蛋白与SUMO蛋白组合一起对人脂联素可溶性的增强作用最为显著,其相应的融合蛋白几乎全部可溶.另外,通过酵母SUMO/Ulp1反应,经His标签亲和层析纯化得到的人脂联素融合蛋白能被有效酶切,加工为人脂联素成熟肽产物.
[目的]本文旨在研究高精料条件下,产朊假丝酵母(Candida utilis , I )、酿酒酵母A (Saccharomyces cerevisiae A,Ⅱ)、酿酒酵母B(Saccharomyces cerevisiae B,Ⅲ)、酿酒酵母 C(Saccharomyces cerevisiae C,IV)和热带假丝酵母(Candida tropicalis ,V )等 5 株酵母菌及其不同组合对牛瘤胃代谢影响,确定酵母菌之间的复合效应并筛选出优良的酵母菌组合.[方法]通过体外发酵技术,研究并分析 5 株酵母菌及其组合在添加量为 1×108 CFU·30 mL-1活菌数发酵液时,对牛瘤胃微生物体外发酵参数的影响.[结果]试验结果显示,不同酵母菌对瘤胃发酵的影响不同.在维持瘤胃内环境稳态方面,Ⅱ与 IV和 V存在复合效应,Ⅱ+IV、Ⅱ+V 组合较各单一菌株均可显著提高发酵液 pH值(P<0.05),降低发酵液总产气量(P<0.05);Ⅲ和IV、IV和V在降低氨氮(NH3-N)浓度方面存在复合效应.在调节瘤胃发酵模式方面,Ⅱ、Ⅲ和 V以及Ⅱ、IV和 V之间存在复合效应,乙酸比例及乙丙比均显著低于组内各单一及 2株组合菌,丙酸比例均显著高于组内各单一及 2 株组合菌(P<0.05 );Ⅱ、Ⅲ和 IV在戊酸形成方面存在复合效应,戊酸比例极显著高于组内各单一及 2 株组合菌(P<0.01).[结论]在高精料条件下,Ⅱ+IV、Ⅱ+V、Ⅲ+IV、IV+V、I+Ⅲ+IV、Ⅱ+Ⅲ+V、Ⅱ+IV+V菌株组合间存在复合效应.其中,Ⅱ+IV、Ⅱ+V组合在维持瘤胃 pH 值、稳定瘤胃内环境方面效果显著,是该条件下较为优良的酵母组合.
地方标准的发布有利于将现有高效优质丰产的栽培技术等葡萄产业链中多个环节以标准化的形式进行推广.本文对我国葡萄产业标准化现状进行统计发现,现行国家、行业和地方标准共328项,其中地方标准298项.对不同省份地方标准的数量进行着重分析,发现新疆地方标准数量最多.对近30年发布标准规律进行分析,发现从1990年第一项地方标准制定以来,不同类型地方标准中方法标准发布的数量最多,有201项;鲜食和酿酒葡萄相关的标准分别有110项和71项;参与起草地方标准最多的单位为各地农业科学院,其中新疆农业科学院参与起草了14项标准.最后,本文对这298项地方标准有关情况进行介绍,总结当前我国葡萄产业地方标准的特点,以期推进我国葡萄产业标准化进程和高质量发展.
本试验旨在为后期反刍动物微生态制剂研制筛选出高活性酵母菌株。试验测定了6株酵母菌[产朊假丝酵母（ Cadida atilis） BY、热带假丝酵母（ Candida tropicalis） BR、热带假丝酵母B2、酿酒酵母（ Saccharomyces cerevisiae） YR、酿酒酵母YC和酿酒酵母BC]产营养活性物质（β-葡聚糖、甘露聚糖、有机酸、氨基酸和多肽）的能力，并使用DPS 14．10软件运用Topsis法对试验数据进行了多指标综合分析。结果表明：热带假丝酵母BR产β-葡聚糖、甘露聚糖能力最强，其细胞壁中β-葡聚糖、甘露聚糖含量分别为80．2、60．5 mg/g；产朊假丝酵母BY产有机酸能力最强，其培养液中总有机酸含量为344．46μg/mL；酿酒酵母BC产多肽能力最强，其培养液中多肽含量为14．08 mg/dL。多指标综合分析结果表明最优菌株为热带假丝酵母BR，其产β-葡聚糖、甘露聚糖、丁二酸、谷氨酸和半胱氨酸的能力均最强，其细胞壁中β-葡聚糖、甘露聚糖含量分别为80．2、60．5 mg/g，培养液中总有机酸、总氨基酸含量分别达到312．11μg/mL、4．705 mg/g。通过6株酵母菌产营养活性物质能力综合比较分析得出最优菌株为热带假丝酵母BR。
[目的]探索百里香精油(thymo essential oil)的化学组成及其作用机理.[方法]采用水蒸气蒸馏法提取百里香精油,利用气-质联用技术(GC-MS)测定化学成分,研究抗氧化性、抑菌作用和毒理特性.[结果]百里香精油含有85种化学成分,且以酚类物质为主.百里香精油具有很强的抗氧化性,抗氧化能力高于维生素E,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉菌、啤酒酵母菌的抗菌性均表现为敏感型,但碱性条件和热处理降低其抑菌作用.[结论]经动物试验百里香精油属无毒型,可安全用作食品添加剂和化工香料.
通过对酿酒葡萄园中主要危害鸟的种类及危害特点进行调查与分析,发现鸟害的发生状况与葡萄品种、栽培方式、栽培区域的自然环境条件密切相关.