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高山被孢霉中Δ6脱饱和酶关键位点及其对活性的影响

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-07-03 阅读:741
高山被孢霉中Δ6脱饱和酶(MaFADS6)是决定ω3/ω6多不饱和脂肪酸代谢流的关键酶.利用定点突变技术研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系,为高山被孢霉多不饱和脂肪酸的合成提供了理论依据.利用非链取代式质粒扩增技术对已构建质粒pYES2/NT C-MaFADS6-I内的表达单元(即MaFADS6-I)中细胞色素b5区(HPGG)下游的位点进行定点突变,将所有突变体分别转化酿酒酵母进行诱导表达,进一步通过在培养基中添加Δ6脱饱和酶的底物来考察重组菌对各底物的催化作用.实验结果表明,所有突变体催化α-亚麻酸(ALA)的活性没有改变;K61和D68两个位点对催化亚油酸(LA)起关键作用,其对应的4个突变体对LA的转化率分别为(6.2±0.5)%(K61T)、(0.3±0.0)% (K61F)、(8.2±0.7)% (D68N)和(6.6±0.8)%(D68L),相比原始转化率各降低50%以上;G63和T69两个位点对LA的催化无直接影响,但G63T突变体由于突变位点极性改变,其对LA的转化率为(8.5±0.9)%,比原始转化率降低了49.9%;而V66位点的突变体对LA的转化率分别为(22.3±2.6)% (V66T)和(20.7±2.5)% (V66A),比原始转化率分别降低了36.1%和37.8%.确定了MaFADS6-I氨基酸序列中K61和D68两个关键氨基酸位点经突变后均会使其酶活明显降低,这为研究MaFADS6-I一级结构与功能的关系提供了理论依据.
通过干燥的方法使酵母细胞脱水并进入休眠状态即固态活性干酵母,其储运方便,且可长期保存,广泛应用于酿酒、烘焙、生物防治等方面.在制备活性干酵母的过程中菌体干燥是一个重要环节,文章介绍了成本低、可行性高、能够长时间保存且能耗小的真空干燥、喷雾干燥、流化床干燥等热干燥方法的原理及应用进展;分析了整个热干燥过程前后影响活性干酵母活性的相关因素,包括酵母自身对外界环境的耐受力、酵母培养条件、保护剂添加、干燥工艺条件、贮藏及复水条件等;并进一步论述了提高其活性的方法.
分别考察了酵母种类和小麦芽品种对成品小麦啤酒有机酸组成的影响.基于德国品牌小麦啤酒的有机酸组成,确定了小麦啤酒主要有机酸的较佳组成范围,并且通过L_9(3~3)正交实验设计,最终确定了较佳的发酵工艺参数:麦汁pH5.5;接种量为1.0×10~7个/mL;主酵温度10℃.研究表明,选择产酸合理的酵母菌株和优良的小麦芽以及使用较佳发酵工艺,可以有效地降低乙酸、琥珀酸含量和增加柠檬酸含量,进而优化小麦啤酒的有机酸组成,这对改善小麦啤酒的酸感和风味都有很大的指导意义.
本发明属于自助销售设备技术领域,公开了一种散装白酒智能销售装置。本发明包括机体,所述机体的下层设有接料仓,所述机体的上层设储酒筒,所述储酒筒的上端设有进液口,所述进液口经管道连通有用于将白酒注入储酒腔的泵;所述储酒筒的下端设有出液口,所述储酒筒的外围套设有壳体,所述壳体的内壁上设有蒸发器,所述蒸发器连接有设置在壳体外部的压缩机,所述压缩机连通有冷凝器,所述冷凝器连通有制冷剂储液罐,所述制冷剂储液罐与蒸发器连通;所述压缩机电连接有太阳能发电装置。
为实现啤酒糖度和pH值的快速检测,采用可见/近红外光谱仪器得到360个啤酒样本的可见/近红外光谱数据.使用主成分分析(PCA)对数据进行降维处理以消除众多信患共存中相互重叠的部分,得到6个主成分值.将样本数据随机分为定标集和预测集,利用最小二乘支持向量机(LS-SVM)算法在定标集数据基础上建立啤酒糖度和pH值预测模型,并利用此模型对预测集样本进行预测.根据预测相关系数(r)和预测标准偏差(RMSEP)判断预测模型好坏,结果表明该模型对啤酒糖度预测的相关系数r为0.9829,RMSEP为0.1506;对啤酒pH值的预测相关系数r为0.9563,RMSEP为0.0494,预测精度明显高于神经网络和PLS预测,所以利用该模型能够准确的预测啤酒的糖度及pH值.
自20世纪90年代以来,山东省高密市的酿酒葡萄产业,随着葡萄酒市场的走红而悄然崛起.至2000年,全市酿酒葡萄种植规模达到了1333.3hm2,一跃成为全国重要的酿酒葡萄生产基地.近几年来,酿酒葡萄的产量和质量都有了较大程度的提高.

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