β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达

β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中.本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经Sac I线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母；经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku.β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃.
RAVE（ regulator of the H＋-ATPase of the vacuolar and endosomal membranes）是调节液泡ATP酶（ V ATP酶）装配与拆卸过程的调节酶，由Rav1p、Rav2p和Skp1p 3个亚基构成。在酿酒酵母细胞中，当葡萄糖耗尽时，V ATP酶分解成V1、V0两部分，此时，RAVE与V1以复合物的形式存在于细胞质中。本研究利用同源重组技术，构建在基因RAV2的3′端定点插入FLAG标签的重组菌株BY4742 RAV2 FLAG，通过亲和层析原理纯化RAVE V1复合物，为后续利用电子显微镜对其进行三维结构研究奠定坚实的基础。结果表明：FLAG标签添加到Rav2p的C端可以成功纯化出RAVE V1复合物；结合质谱鉴定首次发现了Leu1p与RAVE存在相互作用关系，这使得对RAVE的研究转向一个全新的方向；此外，本研究方案对其他调节蛋白及与之相互作用的蛋白组的分离纯化具有借鉴意义。
为确定新疆啤酒大麦优质高产栽培的适宜播种期,选用甘啤4号、垦啤7号、新啤4号、新啤8号作为试验材料,设置4月9日、14日、19日、24日、29日5个播种期,研究不同播种期对4个品种啤酒大麦产量与蛋白质含量的影响.结果表明:甘啤4号、垦啤7号、新啤4号、新啤8号这4个品种在4月份播种均能正常成熟,播种早的生育期长,播种晚的生育期短.从生育期天数来看,新啤4号＜新脾8号＜甘啤4号＜垦啤7号,随着播种期的推迟产量逐渐降低,蛋白质含量逐渐升高.建议甘啤4号和垦啤7号等中晚熟品种适期进行早播.
本实用新型公开了一种陶瓷滤芯白酒过滤机，其特征在于：包括过滤机筒体、陶瓷滤芯和端盖，在过滤机筒体的底部设有白酒进口，端盖上设有白酒出口和排渣口，白酒出口与陶瓷滤芯的内部空腔相连，排渣口与陶瓷滤芯的外部空腔相连，陶瓷滤芯与过滤机筒体及端盖之间有密封圈密封。本实用新型采用陶瓷滤芯，同时硅藻土是加入白酒中，具有滤精度高，可以达到0.1微米,生产效率高，可以正洗，反冲洗，更换硅藻土容易的优点。
研究了低温挤压加酶大米啤酒辅料在挤压机内的淀粉降解过程,以及挤压添加耐高温α-淀粉酶大米啤酒辅料的主要挤压参数对麦汁考察指标的影响规律.啤酒厂的生产试验表明,挤压加酶大米辅料麦汁的浸出物收得率比对照的传统不挤压大米啤酒辅料的麦汁浸出物收得率高2.10～3.57百分点,且在糊化过程中遇水不结块.同时省去传统啤酒辅料100℃煮沸液化工序.
CO2啤酒花浸膏因质量稳定,易于储存和利用率高等特点在啤酒酿造中的使用量正在逐年增加.文章考察了超临界CO2萃取啤酒花浸膏的工艺对产品中啤酒花多酚含量的影响,并以超临界CO2萃取啤酒花的萃余物质为原料,研究了从中提取啤酒花多酚的可能性.结果表明,当萃取温度为40℃,萃取压力大于25MPa时,浸膏中的多酚含量明显提高,更高的提取温度得到的产品中多酚的含量没有明显的提高.采用溶剂法从萃余物质中提取啤酒花多酚的实验表明,50%(W/W)的丙酮-水的混合溶剂体系对啤酒花多酚的提取效果最好,总收率可达到83.70%(W/W),从超临界萃取啤酒花的萃余物质中提取啤酒花多酚可提高啤酒花综合利用的价值.