野生葡萄‘燕山-1’ב河岸-3’种间杂交F1代植株耐盐性鉴定

对单芽茎段离体快繁获得的中国野生葡萄燕山-1 (Vitis yeshanensis‘ Yanshan-1’)×河岸-3 (V.riparia‘Hean-3’)杂种F1代的31个株系、河岸-3和酿酒葡萄品种‘赤霞珠’(V.viniera‘ Cabernet Sauvignon’)的组培苗进行耐盐性筛选,以筛选出优良的耐盐株系作为砧木育种的材料.取离体快繁技术获得的试管苗中部生长较为一致的单芽茎段加入含有不同浓度NaCl的生根培养基中,培养40 d内观察盐害症状,计算盐害指数,用相对耐盐指数对供试材料的耐盐性进行初步分级.通过筛选将供试的燕山-1×河岸-3杂种F1代的31个株系分为5个类型:11个株系为高耐盐葡萄、5个株系为耐盐葡萄、7个株系为中耐盐葡萄、5个株系为盐敏感葡萄、3个为盐高敏葡萄.此外,河岸-3为高耐盐葡萄、‘赤霞珠’为盐敏感葡萄;燕山-1×河岸-3杂种F1代的31个株系中有8个株系的耐盐表现优于父本河岸-3,出现超亲遗传现象.通过初步筛选,鉴定出11个高耐盐的杂种F1代株系,可以作为优良的砧木材料.
研究了利用处理啤酒废水的粉煤灰废渣作为固氮菌的载体,与常规的氮肥、钾肥和磷肥复混生产粉煤灰微生态复混肥的依据、原理与工艺.粉煤灰微生态复混肥总养分31%,其中养分比例为N∶P2O5∶K2O∶有机物=1∶2.01∶0.96∶0.79,固氮菌数6.9×107个/g,粉煤灰占质量分数44.03%.通过小白菜等作物的种植试验表明,粉煤灰微生态复混肥具有改良土壤结构,长效缓释,均衡作物营养,增强作物抗逆性和抗病能力,改善作物品质等优点,对作物植株性状的生长优势明显优于常规施肥法.
以3年生、5年生、7年生、10年生欧亚种酿酒葡萄‘蛇龙珠’（Caberbet Gernischt）为供试材料，研究不同树龄对蛇龙珠葡萄光合作用和果实品质的影响。结果表明：树龄对蛇龙珠葡萄的光合作用及果实品质有显著影响，3年生葡萄叶片叶绿素含量最低；10年生葡萄叶片净光合速率和气孔导度值最高，3年生最低。单宁、总酚及可滴定酸含量为3年生含量最高，10年生最低。可溶性固形物含量为10年生最高，3年生最低。
用高效液相色谱法同时分析、示差折光检测器检测酿酒酵母发酵液中的葡萄糖、乙醇及甘油.方法快速、灵敏、操作方便.同时利用高效液相色谱法对酿酒酵母细胞群体发酵初期的代谢行为进行了初步研究.
[目的]通过嫁接木本指示植物进行柑橘类病毒鉴定需要合适的季节和较长的显症时间,并且柑橘木本指示植物的遗传转化和基因功能验证体系尚不成熟,研究其与寄主间的互作较为困难.因此,寻找合适的草本鉴定和实验寄主对于更好地进行柑橘类病毒的鉴定及研究其与寄主间的互作具有重要意义.论文旨在明确中国报道的5种主要柑橘类病毒,包括柑橘裂皮类病毒(Citrus exocortis virold,CEVd)、柑橘曲叶类病毒(Citrus bent leaf viroid,CBLVd)、啤酒花矮化类病毒(Hop stunt viroid,HSVd)、柑橘矮化类病毒(Citrus dwarfing viroid,CDVd)和柑橘树皮裂纹类病毒(Citrus bark cracking viroi,CBCVd)对番茄(Solanum lycopersicum)的侵染能力,进而明确其可否作为5种类病毒的鉴别寄主或实验寄主.[方法]将5种柑橘类病毒的野生型分子变种(分别为CEVd.188,长370nt;CBLVd.032,长328 nt;HSVd.citl06,长296 nt;CVd-Ⅲ.072,长295 nt;CVd Ⅳ Ca,长285 nt)二聚体cDNA克隆质粒(克隆于pGEM-T载体),采用限制性内切酶NdeⅠ在37℃条件下进行酶切线性化处理,经琼脂糖凝胶电泳分析鉴定酶切成功后,将该含有目标片段的线性化重组质粒采用T7 RNA多聚酶在37℃条件下进行体外转录,获得类病毒RNA二聚体溶解于1％K2HPO4接种缓冲液中,机械摩擦接种Alisa Craig和Rutgers番茄(S.lycopersicum var.Alisa Craig和var.Rutgers)叶片,置于24℃温室条件下培养.接种60d后,采集新生叶片采用CTAB法提取番茄叶片总RNA,通过RT-PCR对接种的类病毒进行检测.将PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析后,切胶回收目标片段,与pMD18-T载体连接,热击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞.经PCR鉴定后挑取阳性克隆进行序列测定,采用DNAMAN version 6.0软件对获得的cDNA序列进行相似性分析.[结果]线性化质粒体外转录后经琼脂糖凝胶电泳分析显示,每个质粒转录产物均可检测到目标大小的RNA条带.接种后,RT-PCR检测显示5种类病毒侵染率表现出显著差异,CEVd、CDVd和HSVd可以侵染大部分接种植株(侵染率分别为7/8、5/8和7/8).从接种成功的植株样品中对所接种类病毒后代的cDNA克隆和序列测定显示,随机测定的5-10个克隆中均能找到与接种类病毒cDNA-致的核苷酸序列,后代序列与接种序列间的相似性在99.7％以上;后代分子变异分析显示变异位点小于1 0个,变异率小于0.3％;而CBLVd和CBCVd不能侵染或侵染率很低(0或1/8).[结论]CEVd、CDVd和HSVd能够侵染Rutgers和Alisa Craig番茄,2种番茄均可以作为3种类病毒的草本鉴定和实验寄主;而CBLVd和CBCVd难于侵染Rutgers和Alisa Craig番茄.在接种的Alisa Craig番茄品种上,各类病毒接种植株均比接种缓冲液对照表现显著的矮化效果;在Rutgers植株上,仅有接种了CEVd的植株表现较对照的矮化效果.
以普通饲料豆粕为原料,选用枯草芽孢杆菌、啤酒酵母和黑曲霉作为发酵菌种,以发酵产物中的可溶性蛋白(包括游离氨基酸和小肽)为测定指标,对影响固态发酵豆粕制备大豆肽的主要因素,包括不同的二元组合菌种、菌种比例、菌种接种量、发酵时间、基质水分含量、发酵温度进行了单因素研究;并运用响应面法对最优组合菌种固态发酵大豆肽的条件进行了优化.结果表明:选用枯草芽孢杆菌和黑曲霉混合菌固态发酵豆柏,大豆肽含量最高;其优化条件为:接种量27.95%和52.71%,发酵温度35.92℃,基质含水量52.71%,枯草芽孢杆菌与黑曲霉的菌种比例2:1,发酵时间48 h,在此优化条件下的大豆肽含量为8.73%.