酿酒酵母胱硫醚β-裂解酶的异源表达及催化生成糠硫醇

为明晰糠硫醇生物转化机制,将来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)G20的胱硫醚β-裂解酶(cystathionine β-lyase,Str3p)在大肠杆菌(Escherichia coli)中实现异源表达,并验证其催化性质.正交设计试验优化大肠杆菌基因工程菌蛋白表达的诱导条件,其最适诱导表达条件为诱导温度20℃、异丙基硫代半乳糖苷浓度0.5 mmol/L、诱导时间13h.该条件下获得的菌体经超声破碎和镍柱亲和层析,纯化得到的可溶性Str3p分子质量约为52 kDa,其表达量达1.26 mg/mL,较优化前的表达量和酶活力分别提高41.7％和38.6％.实验发现Str3p能够催化裂解半胱氨酸-糠醛加合物生成糠硫醇,且催化过程受pH值影响较大,在pH 8.0时糠硫醇产量达到47 μmol/L.本研究确定Str3p在E.coli BL21中的异源表达及催化特性,为生物转化合成天然糠硫醇提供新的参考途径.
从品种选择、整地施肥、定植、植株管理、肥水管理、病虫害防治、冬季管理等方面介绍了嘉峪关市戈壁酿酒葡萄丰产栽培技术,以供果农参考。
以酿酒酵母菌单倍体T-27(α trp- ura-)及其耐盐突变株T-27-12(α trp- ura-)为试验对象,考查了在高盐(25% NaCl) 冲击条件下菌体生物量,并应用荧光偏振法对冲击条件下菌体细胞膜的流动性进行测定,试验数据表明:高盐冲击条件下T-27-12(α trp- ura-)生物量明显高于T-27(α trp- ura-),耐盐突变株T-27-12(α trp- ura-)细胞膜的稳定性明显高于其亲株T-27(α trp- ura-),说明T-27-12(α trp- ura-)较其亲株有较强的抵御恶劣环境的能力,因而可以推断细胞膜的稳定性是耐盐突变株较其亲株有更强抵御高盐冲击的一个重要原因.
本发明涉及一种以大豆为主要原料直接生产出的大豆肽白酒及其制备方法。酒中含有大豆2～10%、肽氨基酸0.2～1%。该酒是将完全脱腥的大豆蛋白粉调成2%～10%的乳液,加入适量酶后置于32～50℃、pH值3.0～9.0下进行生化处理,然后加入酵母液和10～30%碳水化合物,并在10～30℃条件下进行7.5～9.5天的前酵处理,再后酵处理20～40天,蒸馏处理得原酒后再陈酿处理40天以上,最后经调配与勾兑,即得大豆白酒。
通过对酿酒葡萄冻害的调查研究分析指出:初霜冻的早晚和冬季的极端低温不是造成酿酒葡萄冻害的主要原因,品种间差异和栽培管理不同也不是造成酿酒葡萄冻害的主要原因,10月份的强降温、气温明显偏低(气温≤-5.2℃)才是酿酒葡萄树体冻害的主要原因.引种抗冻能力较强酿酒葡萄品种、选择适应的生长环境和掌握适宜的埋土时间,是防御酿酒葡萄冻害防御的主要对策.
赤霉素是一种常见的植物激素,在高等植物的各个生长发育阶段都具有重要的调控作用.本实验针对山西临汾地区酿酒葡萄西拉果穗过于紧密、果实酚类物质含量低等问题,采用赤霉素进行拉穗处理:于葡萄开花前20 d和15 d分别采用3种不同质量浓度(3、5、7 mg/L)的赤霉素溶液浸蘸果穗,研究各处理方式下葡萄果实酚类物质的含量及组成差异.结果表明:开花前赤霉素处理对西拉葡萄果穗具有显著拉长作用(P<0.05),并促进了葡萄果实的成熟;单体花色苷含量和非花色苷单体酚类物质含量均随着赤霉素质量浓度的增加而增加,且相同质量浓度下开花前20 d赤霉素处理组单体花色苷含量高于开花前15 d处理组;所有处理组中以开花前20 d 7 mg/L赤霉素浸蘸处理果穗效果最优,该处理能显著提高葡萄大部分单体花色苷和非花色苷单体酚类物质含量(P<0.05),并对酰基化花色苷和黄酮醇类物质的形成有明显的促进作用.