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人铜锌超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及在酿酒酵母中的分泌表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-03 阅读:569
目的:探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的分泌表达.方法:采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu/Zn-SOD的cDNA,与酿酒酵母交配因子(MF)α信号肽编码序列融合,将融合基因插人大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2.0,构建真核分泌表达质粒pYES-MS,将其转化入酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl中,用半乳糖进行诱导表达,采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析及电泳谱活性染色测定表达产物分泌情况及其活性.结果:该工程菌可高效表达一相对分子质量约为21 000的蛋白并与兔抗人Cu/Zn-SOD多抗有特异的免疫反应,同时在培养基上清中检测到此表达蛋白的分泌,具有特异性SOD酶活性.结论:作者成功构建了pYES-MS/INV菌株,该菌株大量表达有天然酶活性的hCu/Zn-SOD,并有部分hCu/Zn-SOD分泌到酵母细胞外,为开发hCu/Zn-SOD的基因工程产品奠定了良好的基础.
本实用新型公开一种浓香型白酒废水处理系统,包括依次管道连接的调节池、盘式过滤器、EGSB反应器、转笼式光催化?生化反应器和清水池,所述盘式过滤器、EGSB反应器和转笼式光催化?生化反应器分别与污泥池管道连接。与现有技术相比,本实用新型提供的浓香型白酒废水处理系统能针对浓香型白酒废水进行高效处理,能耗低,避免传统工艺流程的冗余,浓香型白酒废水被逐级处理,负荷逐级降低,保证了系统的稳定运行和出水水质的优异。
本发明所要解决的技术问题是提供一种首乌白酒及其制备方法,它由何首乌,丹参,稻壳,水组成。各原料蒸馏时的重量百分比为:何首乌44~50%,丹参9~13%,稻壳25~27%,水10~22%。通过混合、拌入糖化酶,酵母搅拌、自然发酵、取出酒糟,淌酒即得本产品。本发明的有益效果是:具备黑须发,益血气,抗衰老等作用。
从橙汁发酵液中分离,利用杜氏小管发酵初筛、产酒精能力和粗略的感官品评复筛,针对耐SO2能力、耐酸能力和GC-MS风味测定三级筛选,并与商业葡萄酒酵母D254进行比较,得到1株优良菌株,编号为20.对该菌株进行分子生物学鉴定,结果表明该菌株为酿酒酵母属,可用于食品发酵.该菌株在含糖量22.Bx的橙汁中,25℃条件下发酵旺盛.相比于葡萄酒酵母D254,20号酵母发酵生产橙酒的总醇、总酯、萜烯类化合物、酸类和酚类物质含量分别提高了50.49%、24.85%、31.67%、44.71%和59.30%,发酵成品口感柔和,香气浓郁,具有典型橙汁香气,适合作为橙汁发酵的酵母.
丙酮酸是一种重要的有机酸,在聚合物、化妆品、食品添加剂、医药等领域具有广泛应用.酿酒酵母被认为是丙酮酸生产的潜在最适微生物,但其糖酵解过程产生的丙酮酸会在胞质内的丙酮酸脱羧酶催化作用下降解为CO2和乙醛,造成碳代谢流的损失.为将更多的碳代谢流引向丙酮酸合成,该研究通过敲除丙酮酸脱羧酶的3个结构基因(pdc1、pdc5和pdc6),显著地促进了丙酮酸积累,但也造成突变菌株XY-156生长缓慢.与进化之前相比,采用适应性进化策略驯化得到的菌株XY-156A,在细胞生长、葡萄糖消耗以及丙酮酸积累方面均获得显著提高;进一步利用2 L发酵罐进行批次补料发酵试验,发酵76 h丙酮酸产量可达105 g/L,生产强度为1.38 g/(L·h),得率为0.5 g/g葡萄糖.结果表明,采用失活丙酮酸脱羧酶与适应性定向进化相结合的策略改造酿酒酵母,能够实现其高效积累丙酮酸,可为生物基丙酮酸工业化生产奠定坚实的基础.
本发明公开了一种上甑布料机,尤其是公开一种用于白酒蒸馏的上甑布料机,属于酿酒蒸馏设备附件设计制造技术领域。提供一种能实现酒糟在甑桶内均匀铺料的用于白酒蒸馏的上甑布料机。所述的上甑布料机包括机架、驱动系统和布料组件,所述的布料组件通过所述的驱动系统沿竖直方向和水平方向可自由移动的布置所述的机架上,外部的上甑喂料机与所述的布料组件连接。

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