酿酒酵母GPDH1基因表达载体pPIC3.5K-ScGPD的构建及其在巴斯德毕赤酵母中的表达

将酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因GPDH1的编码序列构建到表达载体pPIC3.5K中,利用电转化法将构建好的表达载体转入巴斯德毕赤酵母中,利用含有G418的YPD平板筛选到两个阳性转化子,通过分子生物学及外源蛋白表达实验证明,酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因GPDH1已经整合到巴斯德毕赤酵母的基因组上,并且得到了预期的表达.
为加快啤酒大麦新品种扬农啤8号的示范推广,本文以扬农啤8号2年江苏大麦区试和1年江苏大麦生产试验资料为依据,对扬农啤8号主要性状与对照91单2的差异、不同年份主要性状不同参试点的平均数及变异、增产幅度及增产比率、高产潜力及高产产量要素的构成进行了分析,明确扬农啤8号产量在6750～7500 kg/hm2之间的产量结构为:穗数825万/hm2左右、每穗实粒数在23粒左右、千粒重在45 g左右.
为啤酒大麦育种实践提供可靠的信息,采用SSR标记技术对12个已知来源的啤酒大麦品种的遗传背景进行了遗传多样性分析.从筛选出的25对有多态性的SSR引物中共扩增出160个等位位点,其中136个位点有多态性,占85.0%,每对引物可扩增出1～13个位点,平均5.44个等位位点.聚类分析表明,在SM相似系数0.63水平上12个啤酒大麦品种可聚成3类2组.主坐标分析将其分为2类4组.2种分类方法所获得结果基本一致,但主坐标分析更能较为真实的反映12个啤酒大麦品种间的亲缘关系.
提取黑曲霉总RNA反转录得到cDNA第一链,并以之为模板进行RT-PCR扩增出约1.4kb的植酸酶基因,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌DH5α,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后每隔12 h测定植酸酶酶活,结果测得最佳诱导时间为48 h.通过对表达产物的酶学性质研究,发现该表达产物在pH 7.0时具有较高植酸酶活性,同时该表达产物的最适温度约为65℃.
本实验选用符合《饲料添加剂品种目录》的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)EM1、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)JM、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BW2作为发酵菌株对花生粕进行固体发酵,以多肽和总酸含量为指标,通过单因素实验及正交试验对植物乳杆菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌接种量,发酵温度,发酵时间和料液比进行优化.确定工艺参数为:植物乳杆菌接种量5％,酿酒酵母接种量9％,枯草芽孢杆菌接种量9％,料液比1∶1.2,发酵温度37 ℃,发酵时间48 h.在此条件下发酵花生粕,多肽和总酸含量分别为18.89％±0.35％和9.12％ ±0.23％,较优化前分别提高33.78％和24.45％,提高幅度较大,可见优化后工艺稳定且重复性较好.
本实用新型公开了一种白酒加工用加速冷却装置，涉及白酒加工技术领域，包括内壳体和外壳体，内壳体和外壳体通过支撑件连接，内壳体的内腔上端固定连接有水冷热换器，水冷热换器的一端固定连接进水管的一端，进水管的另一端依次贯穿内壳体和外壳体并位于外壳体的外侧，内壳体的顶端中部固定连接进气管的一端，进气管的上端两侧均设有风机，风机与外壳体的外壁固定连接。该白酒加工用加速冷却装置，通过设置支撑件，可将内壳体和外壳体连接起来，对内壳体起到固定作用，通过将内壳体的侧壁设置为星形，增加了内壳体与空气的接触面积，加快冷却速度，通过设置水冷热换器，可将酒蒸气迅速降温，又回收了大部分余热用于生产再利用。