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绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ基因的克隆与表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-10 阅读:308
采用RT-PCR方法克隆到绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)的cDNA序列,测序后构建到酿酒酵母诱导型表达载体pYES2上,转化酿酒酵母,转化子用2%的β-D-半乳糖进行诱导,用Northern杂交、刚果红染色法和CMC糖化力法分别对目的基因的转录和表达产物的葡聚糖内切酶活性进行检测.结果表明,EGⅠ的cDNA基因开放阅读框长度为1 377 bp,编码459个氨基酸,推测蛋白质分子量为48.1 kD.刚果红染色显示,转化子可产生明显的水解圈;CMC酶活检测显示该基因能在酿酒酵母中表达有生物活性的EGⅠ并分泌到胞外.发酵液中的酶活在培养60 h达到最高0.06U/mL,最适酶解温度为50℃,最适pH值为5.4.
[目的]评价不同来源的超氧化物歧化酶(SOD)对果蝇延长寿命,增强繁殖力和抗逆能力的功效.[方法]以黑腹果蝇Drosophila melanogaster为实验材料,比较研究从家蝇Musca domestica中提取的SOD、在毕赤酵母Pichia pastoris中重组表达的人hEC-SOD、在酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae中重组表达的中国拟青霉Paecilomyces sinensis SOD (ps-SOD)以及商品SOD对果蝇寿命、繁殖力和抗逆能力的影响.[结果]在饲料中添加4种SOD均能显著延长果蝇的平均寿命,雌果蝇寿命延长8.09%~12.38%,雄果蝇寿命延长12.01%~15.86%;F1代雌性子代数量增加25.94%~ 30.07%,雄性增加21.75%~ 39.54%.果蝇的耐高温和抗紫外辐射能力与添加的SOD浓度有关.在饲料中添加较高剂量的SOD,使热暴露雌性果蝇的寿命延长7.45%~ 9.88%,雄性果蝇延长13.46%~ 15.12%;受紫外线辐射的雌性果蝇的寿命延长13.47%~ 20.47%,雄性果蝇延长16.49% ~ 23.73%.[结论]综合评价认为,4种SOD均能延长果蝇寿命,增强其繁殖力和抗逆能力,但这些功效在本研究供试的4种SOD间无显著差异,为不同来源SOD的应用提供了重要数据.
研究全价料中添加液态酵益在存放期内菌群活性的动态变化,将活菌制剂液态酵益7.5 mL加入3 kg饲料中,再加入6 g红糖进行无氧发酵,分别取发酵后第0、2、4、6、8、10、14、21、28天的样品进行检测微生物数量变化情况。结果表明:酵益此类微生态制剂加入饲料中发酵,代表性微生物啤酒酵母、枯草芽孢杆菌和植物乳酸杆菌的数量均在前6d之内达到最大值,也就是在饲料发酵后的4~8d饲喂动物,这样有益性最大,而在保存30 d后,有益菌的数量下降到较低水平,不适宜继续保存。
文章介绍了近红外光谱技术的基本原理、测定程序以及该分析方法中的定量分析法和定性判别法,综述了国内外采用该技术评价酿酒葡萄品质指标,鉴定酿酒葡萄品种以及检测酿酒葡萄成熟度等方面的应用进展情况,分析了该技术在检测酿酒葡萄品质时存在的问题以及应用前景.
针对啤酒发酵温度控制系统具有时变性、非线性和滞后性的特征,运用传统控制方法不能实现啤酒发酵温度精确控制的问题.引入论域伸缩因子,设计变论域模糊PID控制器,实现PID参数在线精细整定;以S7-1200PLC控制器和KTP1000触摸屏为硬件基础,开发啤酒发酵自动控制系统,实现人机交互.啤酒发酵试验结果表明:啤酒发酵温度控制误差为±0.09℃,控制精度为0.75%,温度控制系统稳定性好、精度高,提高了啤酒质量.
本发明公开了一种白酒厂酒糟废气处理方法,其特征在于在甑锅和/或废糟堆积箱上方安装废气吸收罩收集废气、输送至旋流板式喷淋洗涤塔内以雾化水喷淋吸附处理、洗涤废水集中到污水处理站处理后循环利用,以及废气高空排放。本发明通过在源头上对散发出来的酒糟气体先进行收集,然后进行消除处理,有机物质的去除率≥90%,有效减少了酒糟气味对环境的影响,降低了环保风险,便于在白酒行业推广。

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