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甘蓝型油菜烯脂酰-CoA还原酶基因BnECR的克隆及功能分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-12 阅读:629
反式烯脂酰-CoA还原酶(trans-2,3-enoyl-CoA reductase,ECR)是催化超长链脂肪酸(VLCFAs)合成的脂肪酰-CoA延长酶之一.根据已报道拟南芥ECR基因设计引物.采用RACE(rapid amplification of cDNA ends)方法从甘蓝型油菜中克隆ECR的全长cDNA序列和对应的基因组序列,命名为BnECR(GenBank登录号分别为FJ899705和FJ899706).序列分析结果显示,BnECR的全长cDNA序列为1 328 bp,对应的基因组序列为2 093 bp,由4个外显子组成,在ORF的上、下游分别有一个163 bp的5UTR和一个232 bp的3q3TR.根据编码区预测BnECR前体蛋白为一个310个氨基酸残基的多肽链,包含ECR蛋白的重要功能位点K144、R145及一个NAD(P)H结合基序G225SGGYQIPR/HG234.NCBI Blastn、氨基酸序列多重比对及保守域分析表明,该基因与拟南芥AtECR基因的同源性最高,是对应拟南芥AtECR的垂直同源基因.RT-PCR分析表明,BnECR基因在甘蓝型油菜根、茎、叶、花及角果中均有表达,其中在茎中的表达量最高.BnECR在高芥酸材料种子发育中后期的表达量显著高于低芥酸种子,表明BnECR可能参与甘蓝型油菜芥酸的合成.将BnECR克隆到酿酒酵母的穿梭表达载体中,分别转化野生型酵母By4743和突变体菌株YDL015c,添加半乳糖诱导表达.气相色谱分析表明,BnECR在酿酒酵母中有效表达,转化菌株中的芥酸(C22:1)di总脂肪酸含量的1.34%.比对照增加52%;对突变体的转化结果表明芥酸含量恢复到野生型水平.
本实用新型公开了一种白酒出酿装置,包括陈酿罐、连通管、密封阀门、连接头、连接管、出酿枪、控制面板、电机泵、出酒管、流量感应器、显示屏、手把、充电口、电池,所述陈酿罐内设有连通管,所述连通管一端通向陈酿罐内底部,连通管另一端设有密封阀门,且连通管另一端位于陈酿罐外部,所述连通管另一端端头设有外螺纹与连接头内的内螺纹相对应,所述连接头通过连接管与出酿枪内的电机泵一端连通,所述电机泵另一端与出酒管连通。与现有技术相比,本实用新型的有益效果是该新型一种白酒出酿装置,用于白酒出酿时使用,可以根据酒瓶的容量自由设置出酒量,便于调节,实用性强,为人们提供极大的便利。
氧是啤酒的头号敌人.本文讨论了氧对啤酒品质的影响、含氧量的控制目标和控制含氧量的措施.
研究了红花油茶籽油对细菌、酵母菌、霉菌的抑制作用,以及其清除自由基和抗油脂氧化功效.结果表明,红花油茶籽油能很好地清除超氧阴离子自由基O-2·;对菜籽油和花生油有较好的抗氧化作用;对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、黄曲霉和啤酒酵母抑制效果明显,其最低抑菌浓度分别为2%、3%、1%、1%,但对枯草芽孢杆菌和米曲霉抑制作用较弱;红花油茶籽油的抑菌活性不受温度的影响,对热稳定性良好;而pH的影响较为复杂,对大肠杆菌和黄曲霉的抑制效果与pH变化无关,但对啤酒酵母和金黄色葡萄球菌的抑制作用以酸性条件较好.
采用微萃取结合GC-MS检测方法,对日照产区公酿一号葡萄成熟果实及其自流汁酿造的桃红葡萄酒进行香气分析.结果显示:醛类、酮类、醇类、酸类、酯类和苯环化合物构成公酿一号成熟果实主体香气,其中(E)-2-己烯醛、正己醛含量远高于其感官香味阈值,且5-羟甲基糠醛、糠醛、二羟基丙酮、2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮在其它酿酒葡萄中鲜有报道;公酿一号桃红葡萄酒中香气组分主要是酯类化合物,占总挥发性成分的85.82%,其它为酸类、醛类、醇类、苯环类和酮类化合物,它们构成公酿一号桃红葡萄酒的主体香气,其中癸酸乙酯、辛酸乙酯、己酸乙酯、乙酸异戊酯、苯乙醇、乙酸苯乙酯等具有凤梨、香蕉、菠萝的果甜香和玫瑰、蜂蜜的花甜香、以及白兰地酒香,构成公酿一号桃红酒的特征香气.
采用同时蒸馏萃取法(SDE)提取有益菌固态发酵普洱茶的香气成分,经气质联用分析鉴定,探讨了授权专利有益菌种(绿色木霉Trichoderma viride Pers.ex Fr.、黑曲霉Aspergillus niger van Tieghem、少根根霉Rhizopus arrhizus Fischer、酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae)固态发酵对普洱茶香气成分的影响.结果表明,绿色木霉固态发酵共分离鉴定出13种化合物,占总检测量的53.66%,其中萜烯醇类化合物及其衍生物含量最高,占33.5%:黑曲霉固态发酵共分离鉴定出18种化合物,占总检测量的74.77%;少根根霉固态发酵共分离鉴定出19种化合物,占总检测量的54.19%/;酿酒酵母固态发酵共分离鉴定出19种化合物,占总检测量的59.15%.黑曲霉、少根根霉固态发酵的普洱茶甲氧基苯及其衍生物含量最高,分别占31.24%、24.04%;酿酒酵母固态发酵的普洱茶萜烯醇类化合物及其衍生物与甲氧基苯及其衍生物含量都比较高,分别达21.89%,24.07%.感官审评表明,绿色木霉发酵的普洱茶滋味醇厚回甘,香气陈香透花-木香;黑曲霉发酵的普洱茶滋味醇厚,陈香透花果香;少根根霉发酵的普洱茶滋味醇厚甘滑,陈香浓;酿酒酵母发酵的普洱茶滋味醇和甘滑,香气陈香较显.

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