产5α羟化紫杉二烯醇人工酵母的组合设计构建

利用工程化微生物生产天然药物如紫杉醇在近年来受到研究者广泛关注.本工作研究如何设计和构建人工酵母以生产紫杉醇生物合成途径中第一个由细胞色素P450酶催化的羟化产物——5α羟化紫杉二烯醇(taxadien-5α-ol).利用组合设计原理,选用3种不同红豆杉来源的紫杉二烯5α羟化酶和2种不同植物源的细胞色素P450还原酶,分别对其进行N端穿膜区域的预测和截短,并对还原酶使用2种不同强度启动子进行调控,所得羟化酶模块和还原酶模块之间分别表达共产生72种组合方式.然后将其分别整合入紫杉二烯生产菌株基因组中,最终在72个组合中筛选到48个可以生产5α羟化紫杉二烯醇的菌株,最高产量67.3 μg·L-1,在酿酒酵母中实现紫杉二烯C5位羟化产物的从头合成.研究结果表明,利用组合设计策略研究模块间相互作用及其与底盘间适配性将为在微生物细胞中实现细胞色素P450酶系介导的催化反应过程提供重要参考.
类病毒是一类单链、闭合环状低分子量的致病性RNA,大小为246～463bp,无蛋白质外壳包裹,是目前发现的最小病原物.类病毒侵染性强,可导致被侵染的细胞或组织发生异常,侵染后造成类似病毒感染的矮化、斑驳、叶变形、裂皮、斑果和坏死等症状.从类病毒的危害症状、检测及鉴定、致病机理、传播及防治等方面介绍了引起甜樱桃斑果病的啤酒花矮化类病毒.
目的:建立酵母海藻糖的提取方法,并比较啤酒酵母、葡萄酒酵母、高活性酵母、酿酒高活性酵母的海藻糖含量.方法:酵母菌体经液氮研磨后以乙醇-水溶液为溶媒,通过超声波辅助的方法提取海藻糖,采用HPLC法分析海藻糖含量.以酿酒高活性酵母为例,在单因素实验基础上通过正交实验优化酵母菌海藻糖的提取工艺,并比较4株食用酵母菌海藻糖的含量.结果:酵母菌细胞海藻糖提取的最优工艺条件为:在80℃的条件下,乙醇浓度为50％,料液比1∶15(g∶mL),提取时间70min,海藻糖得率达(68.10±0.7)mg/g,四株食用酵母菌海藻糖含量大小次序为:酿酒高活性酵母＞高活性酵母＞葡萄酒酵母＞啤酒酵母.结论:优化的酵母海藻糖提取的工艺简单,得率高;方法学分析显示HPLC-RI分析海藻糖含量方法准确,重现性好,方便快捷;不同生产用途的酵母菌株海藻糖含量存在差异.
本发明涉及白酒加工技术领域，尤其涉及一种南瓜白酒的加工方法，本发明通过将南瓜先置于温度为80℃?100℃的蒸汽环境中进行加热至熟透，然后搅拌成南瓜，在冷却至温度为50℃?55℃，然后加入复合酶、酸味剂，将其pH调节为4.0?5.0后，转入温度为40℃?50℃的恒温环境中，并接入复合菌种发酵后，转入温度为15℃?30℃的环境中，加入复合酵母菌发酵，最后加水搅拌，再将其密封放置1?2月后，经高压均质处理、灭菌、装瓶，获得成品，本发明所用的原料来源丰富，添加物用量少，产酒时间短，产酒率高，且制备而得的南瓜白酒口感纯正，适口性好，营养丰富，使其具有壮骨强筋、润肺益气、驱虫解毒、美容等作用。
酿酒葡萄定向栽培技术是以品质为中心内容的一整套系统的质量控制体系.其内容主要包括根据酒种对葡萄含糖量和含酸量的要求,确立不同品种葡萄质量要求确定其丰产指标,并为达到这一目标制订明确的栽培技术措施.这也就是说只有确定的栽培技术,才能达到合理的负栽量、适宜的产量,才能达到该品种的品质要求.
涩感是影响红葡萄酒感官质量及内在品质的关键因素.文章参考国内外研究结果,对比分析了红葡萄酒中的涩感物质、涩感产生机理、涩感强度及质量的影响因素、涩感的评价方法,为改善红葡萄酒质量提供参考.红葡萄酒中的涩感物质包括缩合单宁、水解单宁以及有机酸,涩感是由涩感物质和口腔作用引起的一种干燥的、粗糙的、褶皱的,收敛性的触觉,涩感的强度及质量主要取决于单宁的浓度、聚合度、结构特点,此外还受葡萄品种、产区、酿酒方式影响,涩感的评价方法主要有感官评价、化学分析这2大类,这2种方法往往结合使用以获取最佳分析结果.此外,合理选择葡萄原料及酿造方式也是提升红葡萄酒质量的有效方法.