大肠杆菌表达腺苷蛋氨酸合酶及产酶条件优化

腺苷蛋氨酸(adenosymethionine,SAM)是人体中重要的代谢中间体,在医疗上被广泛应用于治疗肝炎,抑郁症以及关节炎等疾病.酶法进行腺苷蛋氨酸的生产具有良好的工业前景.将来源于酿酒酵母BY4741中的腺苷蛋氨酸合酶基因(sam2)进行密码子优化后,与pET-28a(+)和pET-3b(+)进行连接获得重组质粒pET-28a(+)-sam2和pET-3b(+)-sam2,分别实现其在E.coli BL21(DE3)和E.coli Rosetta(DE3)中的异源表达,结果表明,重组菌E.coli BL21/pET-28a(+)-sam2的SAM酶活较高,达到0.184 U/mL.对该重组菌株进行发酵条件优化,在最优条件下,SAM合酶最高酶活为0.245 U/mL,比优化前提高34％.
目的 研究迪氏迷孔菌Daedalea dickinsii(Berk.)Yasuda子实体的化学成分.方法 迪氏迷孔菌子实体的甲醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到6个化合物,分别鉴定为(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(1)、(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(2)、星鱼甾醇(3)、6-甲氧基啤酒甾醇(4)、16-乙酰基多孔菌酸C(5)、3α-羧基乙酰氧基-24-亚甲基-23-氧代羊毛甾-8,24 (31)-二烯-26-酸(6).结论 化合物1～4、6均首次从该真菌中分离得到.
为了使酿酒酵母较好地利用木糖产生乙醇,将来自Thermus thermophilus的木糖异构酶基因XYLA和酿酒酵母自身的木酮糖激酶基因XKS1,构建到酵母表达载体pESC-LEU中,导入酿酒酵母YPH499中,同时成功表达了两种酶基因.该菌以木糖为唯一碳源进行限氧发酵,木糖的利用率为9.64%,为宿主菌的4.17倍,产生2.22 mmol·L-1的乙醇.同时初步探讨了两种酶基因的表达量对酿酒酵母发酵木糖生成乙醇的影响.木糖异构酶对木糖的利用起关键性的作用,木酮糖激酶的过量表达不利于乙醇生成.
优化了酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae GIM-2发酵工艺条件并对其发酵造纸污泥产乙醇进行了研究.以模拟造纸污泥水解液中糖成分的混合糖为试验原料,采用响应面分析法优化酵母发酵生产乙醇工艺,得优化条件:温度33.1℃,pH值5.4,摇床转速50 r/min,发酵24 h糖醇转化率为38%.造纸污泥在纤维素酶作用下水解48 h,纤维素转化率为58.2%,水解液在优化条件下发酵24 h槠醇转化率为28.4%,产率达0.14g乙醇/g污泥,是理论值的37.3%.
微卫星因其在真核生物基因组中分布广泛、多态性丰富、呈选择中性和共显性遗传等特点,已成为继RFLP之后的第2代分子遗传标记,广泛用于酿酒酵母菌株的分类鉴定、菌株间的亲缘关系分析和酿酒酵母群体遗传多样性分析.本文综述微卫星标记的应用原理及其在酿酒酵母研究中的应用进展.
一种卧式回流节能白酒蒸馏锅，涉及蒸馏设备技术领域，它包括灶台、烟道、酒糟箱和冷凝器，灶台顶端设有排烟口，灶台通过排烟口与烟道连通，烟道上方和下方分别设第一水道和第二水道，第一水道一端与加水管连接，第一水道与第二水道之间通过水管连接，第二水道内设有电加热棒，第一水道顶端设有酒糟箱，酒糟箱通过蒸汽管与第一水道连通，蒸汽管呈倒U型状，蒸汽管一端口位于第一水道内，蒸汽管另一端口位于酒糟箱内，酒糟箱内水平放置多孔板，酒糟箱顶端通过锅盖和输送管道与冷凝器连通，冷凝器下部设有出酒口。本卧式回流节能白酒蒸馏锅利用蒸汽带动酒糟流动，既保证了白酒的质量，维持住了白酒应有的醇香，又减少了能源消耗，缩短了蒸馏时间。