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基于木糖异构酶途径的木糖发酵酿酒酵母菌株构建研究进展

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-01 阅读:975
通过异源表达木糖代谢途径,构建能高效发酵木糖产乙醇的工业酿酒酵母菌株,对木质纤维素燃料乙醇的开发具有重要意义.与氧化还原途径相比,木糖异构化途径的表达不会因辅酶不平衡而造成中间产物木糖醇的累积,因此被视为是理想的木糖代谢途径.在木糖异构途径的表达过程中,选择工业酿酒酵母作为出发菌株进行木糖异构酶途径的表达具有突出优势.同时,提高木糖异构酶基因xylA的表达效率对木糖异构菌株的构建至关重要.另外,在对XI菌株进行代谢工程改造时,GRE3的敲除、木糖转运的提升、木糖代谢途径的定向改造等均能有效改善菌株发酵木糖产乙醇的能力.除此之外,进化工程也是提升XI菌株木糖发酵效率的重要方法之一.而在相关机理阐释和改造策略的制定过程中,组学技术已显示出强大的功能.综述了近年来木糖异构酶途径在酿酒酵母中的表达研究进展,同时还对相关研究存在的问题进行了分析.
本试验旨在筛选出能将无机锌高效转化为微生物锌的微生物,并评定其作为锌源饲喂鸡的生物学效价.首先,从实验室已有的16株饲用微生物中筛选出对无机锌具有高转化率的菌株,随后对影响其转化率的无机锌浓度、培养温度、培养时间和菌液接种量进行单因素优化和正交优化.然后,选用18周龄的海兰褐公鸡20只,随机分成4组,每组5个重复,每个重复1只.对照1组和对照2组饲喂无机锌(ZnSO4·7H2 O),饲粮锌含量分别为60和90 mg/kg;试验组1和试验2组饲喂酵母锌,饲粮锌含量也分别为60和90 mg/kg.预试期和正试期各5 d.结果表明:58号菌种(酿酒酵母菌)为最优无机锌转化菌,无机锌转化为微生物锌的转化率达52.68%;在无机锌浓度1.5 mg/L、菌液接种量4%、28℃ 条件下培养66 h,其对无机锌转化为微生物锌的转化效率可达98.01%;以该菌种转化的富锌酵母菌(酵母锌)饲喂鸡,其中锌相对于硫酸锌中锌的相对生物学效价为114.83%.由此可见,58号菌种是一种对无机锌具有高转化率的富锌微生物.
采用测土配方施肥项目"3414"试验部分实施方案进行啤酒大麦优化配方施肥试验,结果表明:苏北沿海垦区黏质潮盐土,中等肥力田块上,啤酒大麦基础地力产量为287.05kg/667m2、供氮量2.33kg/667m2、供磷量2.28kg/667m2、土壤供钾量7.08kg/667m2.其肥料效应为:Y=228.41+31.838N+37.108P-1.164N2-3.745P2+0.3474NP,R2=0.9229.最大施肥量为纯氮14.519kg/667m2、五氧化二磷5.627kg/667m2,最高产量563.937 kg/667m2:最佳经济施肥量为纯氮13.387kg/667m2、五氧化二磷5.291kg/667m2,最佳经济产量562.155kg/667m2.
为避免啤酒大麦倒伏,提高其生产水平,阐述了啤酒大麦倒伏的原因及危害,分析了化控防倒抗倒的效果,并提出了啤酒大麦防倒抗倒综合技术措施,以供啤酒大麦大面积生产上参考.
[目的]研究从淋浆水中提取SOD酶的工艺条件.[方法]以陕西太白酒厂酿酒后的淋浆水为材料,比较甲苯、异丙醇和乙醇-氯仿3种有机溶剂从淋浆水中提取SOD粗酶液的效果,研究温度和pH对SOD酶活力的影响以及不同异丙醇浓度对SOD提取的影响,采用丙酮2次沉淀对SOD进行分离纯化,并采用H2O2和乙醇-氯仿对样品SOD酶类型进行敏感性鉴定.[结果]试验确定以80%的异丙醇为最佳粗酶液提取条件.丙酮2次沉淀得到纯化的SOD产品,其酶比活为1 026 U/mg,酶回收率达65.2%.该酶经H2O2和乙醇-氯仿敏感性鉴定为Cu·Zn-SOD,对热和酸碱度具有一定稳定性,在50℃以下,酶相对活性保持在91.2% ~ 100%,pH为3.0~10.0时SOD活性保持在74.1% ~93.6%.[结论]该提取工艺过程简便,易操作,是较为理想的从淋浆水中提取SOD的工艺.
研究了木棉花红色素的微波提取工艺和木棉花色素乙醇提取液的抗菌性能.结果表明,木棉花色素微波提取的最佳工艺为微波功率750w、微波辐射时间90s、固液比1∶60(W/V).一定浓度的木棉花红色素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和酿酒酵母均有抑制作用,抑菌作用强弱的顺序为:金黄色葡萄球菌>酿酒酵母>大肠杆菌>黑曲霉.

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