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重组真菌细胞色素P450nor2在酵母细胞中的表达

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-06-09 阅读:689
酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是一种理想的真核蛋白表达系统.将真菌细胞色素P450nor2基因亚克隆到酵母表达载体pAUR123中,构建重组表达质粒pAUR-P450nor2并转化酿酒酵母AH22,经Aureobasidin A筛选和菌落PCR鉴定得到阳性克隆.SDS-PAGE分析证实:重组的真菌细胞色素P450nor2在酵母细胞中实现了高表达.
[目的]研究不同采收期对新疆焉耆盆地酿酒葡萄及葡萄酒的影响,为确定酿酒葡萄最佳采收期提供依据.[方法]以葡萄转色期后、不同采收时段的5种红色酿酒葡萄果实和葡萄酒为研究对象,测定果实品质和葡萄酒理化指标,分析不同指标和葡萄最佳采收期之间的关系.[结果]果实品质:梅鹿辄和赤霞珠果实的纵径、横径以及单果重随着采收日期的推移总体均呈现先逐渐增大后减小的趋势,而黑比诺、北玫和北红果实的纵径、横径以及单果重随着采收日期的推移逐渐增大.葡萄果实pH、可溶性固形物含量、固酸比和糖酸比都呈逐渐增大趋势.可溶性固形物从高到低为梅鹿辄>北红>北玫>赤霞珠>黑比诺.酿造品质:各品种的pH和酒精度随着采收日期的推移,呈现缓慢上升的趋势;酿制的酒样中,黑比诺的总糖含量最高为5.48 g/L,赤霞珠的总糖含量最低为3.71 g/L,均符合GB/T15037-2006葡萄酒分类标准.[结论]在新疆焉耆盆地地区梅鹿辄和赤霞珠的最佳采收期在8月25日,黑比诺、北玫和北红的最佳采收期在8月28日.
本发明公开了固态法白酒蒸馏上甑布料机,涉及白酒蒸馏设备技术领域,主要用于解决人工上料不均匀的问题。其主要结构为:包括搅拌机构和送料机构,送料机构的出料端连接有布料机构,布料机构包括竖直向依次连通的上部料仓和能够绕轴向转动的旋转下料筒,旋转下料筒内部设有围绕其轴心设置且开口向上的下料小仓,下料小仓下部设有两端分别向旋转下料筒的轴心和边缘延伸的出料口,出料口下方设有贴近出料口设置且与其同向延伸的下料电动滚筒,旋转下料筒的下方设有甑桶。本发明提供的固态法白酒蒸馏上甑布料机,其能够自动将酒醅料均匀布撒在甑桶中,节省了人工的同时也保证了生产的质量。
[目的]研究在豇豆生长过程中施用啤酒糟型生物有机肥对豇豆光合特性的影响.[方法]采用田间小区试验,共设4个处理,以自然堆肥+化肥处理、纯化肥处理作为对照,比较啤酒糟型生物有机肥和双效活性精致有机肥2种肥料对豇豆功能叶光合特性的影响.[结果]在开花结英期,啤酒糟型生物有机肥处理豇豆功能叶净光合速率、胞间CO2浓度、叶绿素含量最高.[结论]啤酒糟型生物有机肥能明显促进豇豆中后期功能叶净光合速率,提高叶绿素含量,但对功能叶气孔导度影响不大.
将扩增得到的三疣梭子蟹LGBP基因开放阅读框与表达载体pET-22b(+)连接,转化E.coil BL21(DE3)plysE后IPTG诱导表达.经SDS-PAGE检测,发现诱导组比空载体和未诱导组多出一条分子量约为41 ku的表达产物,与预测的重组蛋白分子量大小基本一致.重组质粒在不同IPTG浓度和不同温度条件下诱导表达产物的SDS-PAGE分析结果显示,低浓度0.4 mmol/L IPTG和30℃诱导能有效减少菌体蛋白的本底表达.用纯化的重组蛋白连续免疫小鼠,4周后得到抗血清,经Western-blotting检测,其具有很好的特异性.微生物结合实验表明,重组表达的pET-LGBP具有较强的生物活性,其与丹麦啤酒酵母、巨大芽孢杆菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、大肠杆菌等均有结合能力.
本发明公开了一种浓芝复合香型白酒生产工艺,该生产工艺包括备料、配料、糊化、加曲、堆积、入窖、蒸馏步骤,配料重量份比例:高粱110~130份、麸皮11~13份、稻壳28~32份、蒸酒后热酒醅460~500份;加曲比例:按高粱重量28~32%的比例加入混合曲,按高粱重量4~6%的比例加入细菌曲;堆积步骤控制堆积水分为46~47%,秋、冬、春季节堆积48小时;夏季堆积24小时,入窖步骤控制堆积发酵酿酒材料含水量为56~57%,控制堆积发酵酿酒材料温度为23~26℃,将堆积发酵酿酒材料加入到全泥窖池里发酵67天。该工艺技术糊化效果好,出酒率高,白酒产品清澈透明,具有浓香、酱香、芝香相兼,复合香幽雅舒适,绵厚丰满,酒体协调,尾净余香的特点。

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