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刺葡萄 DFR 基因克隆及生物信息学分析

来源:酒旗网  作者:酒小旗   2023-07-01 阅读:920
根据葡萄 DFR 基因 CDS 序列设计刺葡萄开放阅读框(ORF)特异引物,利用 RT-PCR 技术克隆获得其 DFR 基因序列,并通过生物信息学方法分析其生物学特性。结果表明,刺葡萄 DFR 基因 ORF 序列全长1014 bp,编码337个氨基酸,命名为 Vitis davidii dihydroflavonol 4-reductase gene (VdDFR ),GenBank 登录号为 KF915803。刺葡萄 DFR 蛋白预测分子量为37593.2 Da,理论等电点 pI 为5.81,是一个跨膜亲水蛋白,无典型信号肽,不属于分泌蛋白,并且亚细胞定位主要位于细胞质中(70%);二级结构以无规则卷曲为主(52.82%),是一种 mixed 类蛋白;该蛋白有潜在的7个糖基化位点和16个磷酸化位点,具有 NAD (P)结合位点,有 NAD 依赖型的表异构酶/脱氢酶的 N 端结构域,属于 NADB _ Rossmann 超家族成员。核苷酸序列分析表明,刺葡萄 DFR 基因与美丽葡萄、山葡萄和酿酒葡萄的同源性为99%,与圆叶葡萄同源性为98%,与显齿蛇葡萄同源性为94%,进化上比较保守,利用 DFR 基因编码区碱基序列所建立的系统关系树与真实的植物进化基本一致。
本发明公开一种淮山白酒的酿制方法,其步骤为:1)在煮熟的淮山中,加入其重量0.01~0.5%的红酒曲和0.1~1%的白酒曲,于20~30℃的温度下糖化发酵1~5天,然后倒料,再加入淮山重量10~50%的水,于30~35℃的温度下继续发酵5~8天,发酵液过滤,蒸馏,即得半成品的淮山酒;2)半成品的淮山酒,静置存放1~3个月后,加入其重量5~15%的淮山浸提,过滤,去渣即得淮山白酒。该酿制方法简单易控,采用发酵技术和浸提技术相结合,制得的淮山白酒不仅保留淮山的营养价值及保健功能,而且香气浓郁,口感清爽醇厚。
本发明公开了一种白酒醇香味茶干及其制备工艺,其各原料组分之间的重量配比为:黄豆150-200、白酒15-20、马齿苋3-5、曲曲菜4-6、木瓜汁8-10、胡萝卜5-7、桑叶1-3、向日葵根1-3、酱油3-5、冰糖3-5、茶叶4-6、八角2-4、桂皮1-3、甘草3-5、茴香1-3。本发明工艺中,在黄豆磨浆前进行了一次浸泡、冷冻、烘干和二次浸泡的处理过程,大大降低了黄豆原本的浸泡时间,提高了茶干的制备效率;加入了马齿苋、胡萝卜等原料,为茶干增添了更多的维生素,白酒直接加入到豆浆中,做出的茶干具备了白酒的醇香,口感更独特。
为改善啤酒糟蛋白的凝胶性能及氨基酸组成,采用单因素试验及响应面试验研究谷氨酰胺转氨酶改性啤酒糟与大豆蛋白混合的最优工艺条件,探讨啤酒糟蛋白添加量、加酶量、水浴温度、水浴时间和pH值对混合蛋白凝胶性能的影响.结果表明,湿磨法所得啤酒糟蛋白的蛋白质质量分数为52.23%,其氨基酸组成以Glu、Pro为主,而酶改性最佳工艺条件为啤酒糟蛋白添加量30%、加酶量15 U/g、反应pH 7、水浴温度48℃、水浴时间132 min.在此条件下,混合蛋白的凝胶强度为218.55 g.本研究为啤酒糟蛋白的精深加工提供实验参考.
小麦高产种植栽培技术的研究有利于为我国小麦高产种植提供重要的理论依据,对我国当前农业生产与研究领域有着重要的推动作用.小麦富含多种营养物质,营养价值较高,用途比较广泛,可加工制成面包、馒头等面食用品,发酵后是酿制啤酒、白酒不可缺少的重要原料,又因种植范围比较广泛.因此,小麦种植业的增产技术实施是我国农业生产与发展不可缺少的一部分,在小麦栽培过程中,通过科学、合理地运用高产栽培技术,达到提升小麦品质与产量的目的.
一种用矿沙酿造白酒的方法,是用米和无机物质矿砂作原料酿造白酒:首先,用米代替粮食,其次用各种型号无机物矿砂,均可代替粮食上的糠皮和稻壳、谷壳、麦壳等有机物作松散剂,根除有机物质作松散剂在白酒发酵中生成的甲醇、杂醇油、乙醛、异戊醇和乙酯等杂质对人身健康的伤害,该方法是:把含二氧化硅、三氧化二铝、氧化锰、三氧化二铁、氧化铁、氧化镁、一氧化二钾、一氧化二钠、二氧化钛和水的无机物矿砂(含其他型号矿砂)进行高温膨化,制成保温性能好,生化性质稳定、不腐、不燃、无毒、无味、轻质、含水的无机物松散剂。最后把碎米和无机物松散剂按比例与水调和搅拌成湿料,并顺序蒸料、凉料拌菌、下窖发酵,出窖蒸馏和勾兑成用米酿造的白酒。

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