酿酒酵母APA1的定点突变以及与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因的共表达

应用基因突变技术向酿酒酵母APA1基因中引入同义突变,为进一步研究APA1表达量与酿酒酵母硫化氢产量的关系提供实验基础.从酿酒酵母S288c中利用聚合酶链式反应扩增APA1基因,与EGFP基因融合构建表达载体.以该载体为模板,通过一步法点突变技术向APA1基因中分别引入APA1-1/2/3/4 4个突变.测序结果表明突变位点与预期结果一致.成功获得了APA1的4个同义突变.一步法点突变技术是一种高效的定点突变方法.分别转化酿酒酵母YS59,荧光显微镜下可见绿色激发荧光,表明APA1-1/2/3/4与EGFP基因共表达.
专家系统是人工智能技术的一个重要的应用领域.该文首次将专家系统应用于啤酒污染微生物控制领域之中,详细介绍了啤酒污染微生物控制专家系统的设计和开发,包括对啤酒及污染微生物相关知识和实验技术知识,并对它们进行信息化处理和加工.啤酒污染微生物控制专家系统(beer-spoilage microorganism control expert system,BSMCES)是应用专家系统的基本原理,利用Apache+PHP+MySQL作为开发平台,设计并实现了啤酒污染微生物控制专家系统.该系统可以实现信息咨询、污染控制、决策支持、技术服务等功能.
以苹果鲜榨汁和浓缩汁为原料，分别通过添加蔗糖和稀释的方式使发酵起始糖度为200g／L进行酒精发酵。对发酵产品的常规理化指标和总酚，总类黄酮以及黄烷醇含量进行测定，并对发酵产品进行感官鉴评。实验结果表明：稀释浓缩汁和鲜榨果汁酒样总酸含量分别为2．6g／L和3．2g/L。鲜榨果汁酒样总酚含量、总类黄酮以及黄烷醇含量均高于稀释浓缩汁酒样。两种酒各具特色，鲜榨汁酒样果香浓郁，稀释浓缩汁酒样酒香醇厚。
为探索酿酒葡萄收获机输送装置工作性能，采用Central Composite Design 试验设计与响应曲面优化方法对输送性能进行优化研究，以输送成功率为响应指标，建立了输送成功率数学回归模型。利用残差对回归模型进行可靠性诊断，验证了输送成功率回归模型的可靠度高；对试验结果进行了显著性分析，表明影响输送成功率的因素依次为挡板间隙、输送速度、酿酒葡萄质量（喂入量），且驱动拨爪链主动轮转速及酿酒葡萄质量交互作用显著。应用Optimization （最优化）功能，以输送成功率最大化为优化目标，得到了最优参数组合。
使用DB-WAX毛细管柱,对白酒中醇类、酯类的色谱分离条件进行优化,大大提高了乙酸乙酯、甲醇和丙酸乙酯的分离度,建立了白酒气相色谱的分析方法.在最佳条件下,白酒中各种微量成分得到较好的分离,回收率为95.7%~99.5%,重现性好,准确度高.
对从甘肃祁连产区筛选获得的3株戴尔有孢圆酵母(Torulaspora delbrueckii)的生理特性及发酵性能进行分析,并选用T.delbrueckii R12与酿酒酵母以不同接种方式和接种比例混合酿造赤霞珠干红葡萄酒.结果表明:3株菌均具有良好的抗逆性,可耐受体积分数12％乙醇、400 mg/L SO2和400 g/L糖;在含200 g/L糖的模拟汁中单独接种,3株菌均能完成发酵,乙醇产量(体积分数)达11％,当糖质量浓度不小于300 g/L时,3株菌能启动发酵但未能代谢全部糖分.优选菌株R12在与酿酒酵母同时及顺序接种的混合发酵中均可保持良好的定植能力,其中顺序接种中R12的增殖量更大;酒样中挥发酸含量随T.delbrueckii接种比例的增加而显著降低.研究表明,本土T.delbrueckii发酵性能优良,具有酿造我国地区特色葡萄酒的广阔应用前景.